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摘要:本发明提供一种神经特异性敲除PIWIL1基因突变小鼠动物模型及其构建方法、应用,该方法包括:利用CRISPRCas9技术,针对目的基因的基因结构寻找靶序列,以及设计针对该位点的guide‑RNA;经活性检测后,将具有活性的guide‑RNA和Cas9体外转录;最后将guide‑RNA、Cas9mRNA以及含有loxP位点的donorDNA片段注射到受精卵中,从后代中筛选获得目的exon被flox的阳性小鼠。本发明首次构建了神经特异性PIWIL1基因的小鼠敲除模型,在研究神经性疾病分子机理方面具有较高的应用价值,可作为筛选研究防治抑郁症以及神经退行性疾病的药物以及诊断的分子靶标的动物模型。该动物模型简单稳定、周期短,为能贴合临床进行分期并且符合临床疾病进展的动物模型。
主权项:1.一种构建神经特异性敲除PIWIL1基因突变小鼠动物模型的特异性靶向RNA,其特征在于,所述特异性靶向RNA包括guide-RNA1、guide-RNA2、guide-RNA3和guide-RNA4,所述guide-RNA1的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,所述guide-RNA2的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示,所述guide-RNA3的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示,所述guide-RNA4的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示,其中,所述guide-RNA1和所述guide-RNA2作用于PIWIL1基因的Intron4靶序列,所述guide-RNA3和所述guide-RNA4作用于所述PIWIL1基因的Intron7靶序列,所述Intron4靶序列如SEQIDNO:5所示,所述Intron7靶序列如SEQIDNO:6所示。
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百度查询: 华侨大学 神经特异性敲除PIWIL1基因突变小鼠动物模型及其构建方法、应用
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