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摘要：本发明公开了一种荷花快繁体系的构建方法，具体步骤包括：成熟胚表面灭菌、初代苗培养、走茎增殖、不定芽诱导与增殖、继代培养、驯化移栽。本发明以荷花成熟种子为外植体，取材方便，污染率低，走茎增殖快速，增殖效果好，可用于快繁生产与种质资源保存，为荷花的组织培养技术建立基础。

主权项：1.一种荷花快繁体系的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）灭菌：选取饱满的带壳莲子消毒灭菌备用；（2）初代无菌苗的培养：取出莲心，先将莲心在无菌水中浸泡，然后接入不含激素的MS空白培养基中培养直至莲心出苗，获得初代无菌苗；（3）走茎增殖：将步骤（2）得到的初代无菌苗接种到走茎增殖培养基上培养，直至获得带芽的无菌苗走茎；（4）走茎茎段诱导不定芽：将步骤（3）得到的无菌苗走茎切割为若干个含有2-3个生长点的走茎茎段，将切割好的走茎茎段接到继代培养基上培养，直至走茎茎段的生长点中诱导出不定芽和叶片，获得小苗；（5）继代培养：从步骤（4）得到的小苗中筛选具有3个以上的生长健壮、无畸形的不定芽的小苗，转移接种至新的继代培养基中增殖培养，直至小苗长出根后取出小苗进行组培苗的炼苗驯化，获得组培苗；（6）组培苗的炼苗与移栽：从步骤（5）得到的组培苗中筛选健康强壮的苗进行炼苗，移栽；步骤（1）所述灭菌为用75%的酒精、3%次氯酸钠消毒灭菌；步骤（2）莲心在无菌水中浸泡时间为6-8h；在不含激素的MS空白培养基中培养时间为15-20天；步骤（2）培养条件为每天光照时间为14-16小时，光照强度控制在1500-2500Lx，温度控制在25-28℃；步骤（3）培养条件为每天光照时间为14-16小时，光照强度控制在1500-2500Lx，温度控制在25-28℃；步骤（3）所述走茎增殖培养基配方为MS+6-BA0.5mgL+IBA1.5mgL+NAA0.5mgL+GA1mgL+蔗糖50gL,琼脂8gL,pH=5.6；步骤（4）与步骤（5）所述继代培养基为MS+6-BA1.5mgL+IBA1.2mgL+NAA0.6mgL，蔗糖浓度在40~60gL,琼脂8gL,pH=5.6；步骤（4）培养条件为每天光照时间为14-16小时，光照强度1500-2500Lx；步骤（6）所述炼苗条件为在23℃，1d内14-16小时光照，光照强度1600~2400lx的光照条件下先松开培养瓶盖敞开并加入无菌水培养24-36h，接着在室温和自然光照条件下开盖培养48h。

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