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申请/专利权人：广东华大锦兰农业科技发展股份有限公司

摘要：本发明公开了一种杂交兜兰的快繁培植方法，包括：S1、类原球茎和不定芽的混合体增殖：将杂交兜兰的类原球茎和不定芽的混合体接种到增殖培养基上进行增殖培养，培养温度为25‑30℃；其中，增殖培养基为：每升含有蔗糖5g、植物生长调节剂0.1mg、椰子汁50‑100mL、蛋白胨3g，其余为18‑14MS培养基；S2、将类原球茎和不定芽的混合体接种到分化培养基上进行分化培养；S3、将不定芽接种到生根壮苗培养基上进行培养，得到组培苗；S4、将组培苗移入栽培基质中进行培养，得到兜兰种苗。本发明能够提高兜兰组织培养的类原球茎增殖系数，提高杂交兜兰的繁殖效率，实现在短时间内生产出大量的兜兰种苗，降低生产成本，更好地满足兜兰的市场需求，间接较少对野生资源的破坏。

主权项：1.一种杂交兜兰的快繁培植方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、类原球茎和不定芽的混合体增殖：将杂交兜兰的类原球茎和不定芽的混合体接种到增殖培养基上进行增殖培养，培养温度为25-30℃；其中，所述增殖培养基为：每升含有蔗糖5g、植物生长调节剂0.1mg、椰子汁50-100mL、蛋白胨3g，其余为18-14MS培养基；S2、类原球茎和不定芽的混合体分化：将类原球茎和不定芽的混合体接种到分化培养基上进行分化培养；S3、生根壮苗培养：将不定芽接种到生根壮苗培养基上进行培养，得到组培苗；S4、组培苗移栽：将组培苗移入栽培基质中进行培养，得到兜兰种苗；所述步骤S2、S3具体为：S2、类原球茎和不定芽的混合体分化：将成团的类原球茎和不定芽的混合体切成每团鲜重20-40mg，每团包含4-8个类原球茎和4-8个不定芽的小团，接种到分化培养基上进行分化培养，使得类原球茎分化成不定芽；该步骤S2具体为：先将类原球茎和不定芽的混合体接种到第一分化培养基上进行分化培养，然后再将类原球茎和不定芽的混合体接种到第二分化培养基上进行分化培养；其中，第一分化培养基为：每升含有蔗糖5g、2,4-二氯苯氧乙酸0.1mg、椰子汁50mL、蛋白胨3g，其余为14MS培养基，pH=5.8；第二分化培养基为：每升含有蔗糖20g、2,4-二氯苯氧乙酸0.1mg、椰子汁50mL、蛋白胨3g，其余为12MS培养基，pH=5.8；S3、生根壮苗培养：将上述步骤S2得到的类原球茎和不定芽的成团混合体中大于或等于1.5cm长的不定芽分离出来，进一步将不定芽接种到生根壮苗培养基上进行培养，得到组培苗，培养温度为25℃；其中，生根壮苗培养基为：每升含有椰子汁50mL、蔗糖20g、琼脂5g，其余为12MS培养基，pH=6.0；或者，所述步骤S2、S3具体为：S2、类原球茎和不定芽的混合体分化：先将类原球茎和不定芽的混合体接种到第一分化培养基上进行分化培养，然后再将类原球茎和不定芽的混合体接种到第二分化培养基上进行分化培养；其中，第一分化培养基为：每升含有蔗糖5g、2,4-二氯苯氧乙酸0.1mg、椰子汁50mL、蛋白胨3g，其余为12MS培养基，pH=5.8；第二分化培养基为：每升含有蔗糖20g、2,4-二氯苯氧乙酸0.1mg、椰子汁50mL、蛋白胨3g，其余为12MS培养基，pH=5.8；S3、生根壮苗培养：将上述步骤S2得到的类原球茎和不定芽的成团混合体中大于或等于1.5cm长的不定芽分离出来，进一步将不定芽接种到生根壮苗培养基上进行培养，得到组培苗，培养温度为27.5℃；其中，生根壮苗培养基为：每升含有椰子汁50mL、蔗糖20g、NAA0.5mg、活性炭0.3g、琼脂5g，其余为12MS培养基，pH=5.8。

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