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申请/专利权人：江南大学
摘要：本发明公开了一种通过重构辅酶再生系统强化重组大肠杆菌催化合成胆绿素的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过从Clostridiumtetani中获得血红素加氧酶，以E.coliBL21DE3作为底盘细胞，pETDuet为表达载体构建重组大肠杆菌，实现该酶的表达。强化大肠杆菌中谷氨酸脱氢酶的表达，引入辅酶NADPH再生系统，成功构建重组菌株E.coliBL21pETDuet‑gdhAEc‑hoCt，实现E.coli来源的GdhA和C.tetani来源的HO共表达。该重组菌在无需额外添加辅酶NADPH条件下，即可进行全细胞催化血红素合成胆绿素，转化率高达71.5％，为胆绿素的高效生产提供了新途径。
主权项：1.一种全细胞生产胆绿素的方法，其特征在于，利用重组大肠杆菌，在含有血红素和谷氨酸为反应底物的反应体系中反应合成胆绿素；所述重组大肠杆菌以E.coliBL21DE3为表达宿主，在表达载体pETDuet上依次连接编码大肠杆菌自身的谷氨酸脱氢酶和来源于Clostridiumtetani的血红素加氧酶的基因，所述血红素加氧酶为GenBank：AAO36942.1所示的第14～224位氨基酸；谷氨酸脱氢酶的GenBank：AAC74831.1；所述编码所述血红素加氧酶和谷氨酸脱氢酶的基因的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一种通过重构辅酶再生系统强化重组大肠杆菌催化合成胆绿素的方法
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