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申请/专利权人：深圳市先康达生命科学有限公司

摘要：本发明公开了一种两级SynNotch逻辑调控结构及其应用；该两级SynNotch逻辑调控结构包括靶点结合区域、Notchcore区和启动调控蛋白区，且该两级SynNotch逻辑调控结构分为一级SynNotch逻辑调控结构和二级SynNotch逻辑调控结构，而二级SynNotch逻辑调控结构的表达受到一级SynNotch逻辑调控结构的调控。该发明两级SynNotch可以使免疫细胞形成浸润效果，解决了传统CAR结构的常时激活导致的免疫细胞提前耗竭问题、免疫细胞的增殖浸润问题、免疫细胞的过度杀伤及可能发生严重副反应的问题和肿瘤微环境的改善问题，极大的提高了对于肿瘤的杀伤能力及免疫细胞治疗的安全性。

主权项：1.一种包含两级SynNotch逻辑调控结构的组合物，其特征在于，所述逻辑调控结构的组合物分为一级SynNotch逻辑调控结构和二级SynNotch逻辑调控结构，且二级SynNotch逻辑调控结构的表达受到一级SynNotch逻辑调控结构的调控；所述SynNotch逻辑调控结构包括靶点结合区域、Notchcore区和启动调控蛋白区；所述一级SynNotch逻辑调控结构的靶点结合区域为第一靶点，该第一靶点靶向FAP蛋白；所述二级SynNotch逻辑调控结构的靶点结合区域为第二靶点，该第二靶点靶向CLDN18.2蛋白；其中：所述一级SynNotch逻辑调控结构的启动调控蛋白区为第一启动调控蛋白GAL4-VP64；所述一级SynNotch逻辑调控结构用于调控靶向CLDN18.2蛋白的嵌合抗原受体基因、IL-7和CCL-19细胞因子基因、iCas9自杀基因及二级SynNotch逻辑调控结构基因表达，且所述CLDN18.2蛋白的嵌合抗原受体基因、IL-7和CCL-19细胞因子基因、iCas9自杀基因及二级SynNotch逻辑调控结构基因序列前分别包含有可与所述第一启动调控蛋白GAL4-VP64相匹配结合的第一调控蛋白结合区的核酸序列UAS；所述二级SynNotch逻辑调控结构的启动调控蛋白区为第二启动调控蛋白tetR；所述二级SynNotch逻辑调控结构用于调控NAP蛋白基因表达，且所述NAP蛋白基因序列前包含有可与所述第二启动调控蛋白tetR相匹配结合的第二调控蛋白结合区的核酸序列tTA；两级SynNotch逻辑调控结构可以调控IL-7和CCL-19细胞因子的分泌、NAP免疫刺激蛋白的分泌、嵌合抗原受体表达及iCasp9自杀基因的表达。

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