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申请/专利权人：首都医科大学附属北京安贞医院;苏州宇测生物科技有限公司
摘要：本发明涉及检测GDF15浓度的基于计数的单分子检测方法及试剂盒。本发明首次将基于计数的单分子检测方法用于GDF15浓度的检测中，本发明的方法通过普通荧光显微镜即可实现，对设备的要求低，并且检测下限低（灵敏度高），检测动态范围宽，且CV值低。
主权项：1.检测GDF15浓度的基于计数的单分子检测方法，其包括以下步骤：（1）将能够与GDF15结合的捕获抗体固定到磁珠上，加入含有GDF15的样品，使GDF15的第一位点与捕获抗体结合，从而捕获样品中的GDF15；（2）加入能够与GDF15的第二位点结合的检测抗体，使检测抗体与GDF15的第二位点结合，然后加入能够直接或间接与检测抗体结合的原位信号增强粒子；或者先将检测抗体与原位信号增强粒子结合而形成复合物，再将该复合物加入；所述原位信号增强粒子的粒径为180nm~350nm，且含有荧光材料及载体，（3）用光学成像设备将所述原位信号增强粒子发出的荧光信号成像；（4）对原位信号增强粒子的个数进行统计，进一步计算得到样品中GDF15的浓度，其中，步骤（1）和（2）可以分别替换为下述的步骤（1’）和（2’），（1’）将检测抗体与样品混合，使其与样品中的GDF15的第二位点结合，然后加入能够直接或间接与检测抗体结合的原位信号增强粒子；或者先使原位信号增强粒子与检测抗体结合而形成复合材料，再将该复合材料加入样品中，使该复合材料与样品中的GDF15的第二位点结合；其中，所述原位信号增强粒子与所述步骤（1）中的原位信号增强粒子相同；（2’）将能够与GDF15结合的捕获抗体固定至磁珠上，然后加入至步骤（1’）的体系中，使所述捕获抗体与所述GDF15的第一位点结合，从而将GDF15捕获，其中，所述磁珠由磁性羧基取代的聚苯乙烯微球、嘧啶、无水硝酸汞、超支化聚缩水甘油醚组装而成。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 首都医科大学附属北京安贞医院 苏州宇测生物科技有限公司 用于检测GDF15的单分子检测方法及试剂盒
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