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申请/专利权人：湖南大学
摘要：本发明公开了一种DNA纳米笼探针及其制备方法与应用。该纳米笼探针包括具有内部空腔的DNA框架、由双链RFRQ构成的miRNA响应探针与A‑HP发夹。该纳米笼探针的制备方法包括：将双链RFRQ与DNA框架进行退火组装，然后再与A‑HP发夹孵育，形成所述DNA纳米笼探针。本发明得益于DNA纳米框架的尺寸选择性，更小的成熟miRNA而不是更大的pre‑miRNA才能进入DNA纳米笼的空腔进行分子识别，从而显著减少了pre‑miRNA的信号干扰。同时，DNA纳米笼探针无需转染即可进入细胞中并在内源性酶APE1的驱动下对细胞内miRNA成像进行精准检测。
主权项：1.一种DNA纳米笼探针，其特征在于，所述DNA纳米笼探针包括三个模块：具有内部空腔的DNA框架、miRNA响应探针与A-HP发夹；所述DNA框架为由若干条DNA链作为主体骨架自组装形成的几何体，该DNA框架具有尺寸选择能力；所述miRNA响应探针为由双链RFRQ构成的DNA结构；所述双链RFRQ由单链RF与单链RQ杂交而成，其中单链RF具有与靶标miRNA核苷酸序列互补的核苷酸序列，单链RF的5’端与3’端均具有与DNA框架的部分核苷酸序列互补的核苷酸序列；双链RFRQ能与靶标miRNA发生toehold链交换反应进行信号识别；双链RFRQ上标记有荧光基团与相应的猝灭基团；所述miRNA响应探针通过单链RF的5’端与3’端含有的与DNA框架互补的部分核苷酸序列杂交而组装在DNA框架内；所述A-HP发夹从5’端到3’端依次包括stem-1区侧链、环区、stem-2区侧链和linker区，所述stem-1区侧链、环区、stem-2区侧链和linker区均为单链核苷酸；其中，stem-2区侧链上含有能被APE1酶特异性识别切割的AP位点，stem-1区侧链和stem-2区侧链的核苷酸序列互补杂交形成双链核苷酸；linker区具有与DNA框架的部分核苷酸序列互补的核苷酸序列；A-HP发夹通过所述linker区组装在DNA框架上。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 湖南大学 一种DNA纳米笼探针及其制备方法与应用
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