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申请/专利权人:上海领康时代生物技术有限公司
摘要:本发明提供一种牛痘病毒加帽酶纯化的方法,涉及牛痘病毒加帽酶加工技术领域,包括如下步骤:步骤A:将重组表达菌体进行破碎、离心过滤,收集上清;步骤B:将步骤A的过滤上清进行NI亲和层析捕获,得到洗脱样品;步骤C:将步骤B的洗脱样品采用阳离子层析进一步纯化;步骤D:将步骤C的洗脱样品采用疏水层析进一步纯化,SEC‑HPLC纯度符合预期;步骤E:将步骤D的洗脱样品经过超滤换液装置超滤换液后保存至保存液中。相较于市面上复杂、成本高的牛痘病毒加帽酶纯化方法,本发明优化了纯化步骤,样品SEC‑HPLC纯度大于90%,纯化总回收率明显提高,制备成本低。同时本发明的超滤装置进行了适应性改进,使得牛痘病毒加帽酶SEC‑HPLC纯度高,具有更广泛的应用前景。
主权项:1.一种牛痘病毒加帽酶纯化的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:步骤A:将重组表达菌体进行破碎、离心过滤,收集上清;步骤B:将步骤A的过滤上清进行NI亲和层析捕获,得到洗脱样品;步骤C:将步骤B的洗脱样品采用阳离子层析进一步纯化;步骤D:将步骤C的洗脱样品采用疏水层析进一步纯化,SEC-HPLC纯度符合预期;步骤E:将步骤D的洗脱样品经过超滤换液装置超滤换液后保存至保存液中。
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权利要求:
百度查询: 上海领康时代生物技术有限公司 一种牛痘病毒加帽酶纯化的方法
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