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特异性核酸探针、核酸富集法及形成的沙门氏菌检测方法 

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申请/专利权人:甘肃省科学院传感技术研究所

摘要:一种特异性核酸探针、核酸富集法及形成的沙门氏菌检测方法,特异性核酸探针由沙门氏菌Inva基因设计合成,包括5'端修饰氨基用于连接羧基磁珠的捕获探针和3'端修饰TAMRA‑N用于信号检测的检测探针,其中捕获探针3'端和检测探针5'端分别跟待测沙门氏菌特定核酸序列结合形成磁性探针‑待测核酸片段‑检测探针的复合物;待测核酸片段由建立的可放大信号的核酸富集纯化技术提取富集,最后通过检测荧光强度以及标准曲线得到沙门氏菌浓度,达到特异性定量检测沙门氏菌的目的。本发明提供的沙门氏菌检测方法无需增菌,具有高特异性,高灵敏度,可检测实际样品(复杂环境)中微量沙门氏菌,提高了检测灵敏度,同时提高了检测效率。

主权项:1.一种特异性核酸探针,其特征在于:所述特异性核酸探针是羧基磁珠与5'端修饰氨基的寡核苷酸制备而成的捕获探针,3'端修饰TAMRA-N用于信号检测的检测探针;捕获探针3'端和检测探针5'端分别跟待测沙门氏菌的核酸序列:Inva基因序列3’-TAACCAACAATGCCGATAAGACTGG……ATGTTACGACAATAGCGAGTGCGGGA-5’结合形成磁性探针-待测核酸片段-检测探针复合物;捕获探针序列5'端标记有氨基NH2,其序列为5'-NH2-TTTTTTTGGTTGTTACGGCTATTC-3';检测探针序列3'端标记有荧光素TAMRA-N,其序列为5'-ATGCTGTTATCGCTCACGTTTTTTT-TAMRA-N-3'。

全文数据:

权利要求:

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