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申请/专利权人:江西农业大学
摘要:本申请公开了一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法,属于基因工程技术领域,用于在毕赤酵母GS115中实现制备半乳糖激酶、半乳糖‑1‑磷酸尿苷酰转移酶和尿苷二磷酸‑4'‑变位酶。包括:利用SacI线性化重组质粒电转化构建3种带有油茶地蜂mRNA片段的毕赤酵母GS115,并表达生成包括GALK、GALT和GALE在内的3种水溶性酶类。本申请将为半乳糖激酶、半乳糖‑1‑磷酸尿苷酰转移酶和尿苷二磷酸‑4'‑变位酶的制备开创一种新的方法,为破解蜜蜂为油茶授粉后中毒的难题提供技术手段。
主权项:1.一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法,其特征在于,包括:步骤一、将基因序列为SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3所示的mRNA片段分别作为半乳糖激酶、半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶、尿苷二磷酸-4'-变位酶的表达基因,与pPIC9K载体连接得到pPIC9K-GALK、pPIC9K-GALT、pPIC9K-GALE3种重组质粒;重组质粒pPIC9K-GALK的基因序列为SEQIDNo.4,pPIC9K-GALT的基因序列为SEQIDNo.5,pPIC9K-GALE的基因序列为SEQIDNo.6;步骤二、在步骤一所得的pPIC9K-GALK、pPIC9K-GALT、pPIC9K-GALE3种重组质粒电转化毕赤酵母GS115中,获得表达菌株,对获得的表达菌株通过PCR验证以选择阳性菌株,进行蛋白表达验证。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 江西农业大学 一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法
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