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申请/专利权人:海安市中医院
摘要:本发明公开了一种健肠止泻合剂的检测方法,所述健肠止泻合剂由炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅制成,通过多检测波长液相色谱法确定健肠止泻合剂中的指标药物:白芍、陈皮及黄连,并使用以下检测方法实现定性定量检测,主要包括:采用薄层硅胶色谱法对白芍、陈皮、黄连的鉴别,以及通过高效液相色谱法对健肠止泻合剂中芍药苷、橙皮苷以及盐酸小檗碱的含量进行测定,上述检测方法精确度高、重复性好,可有效检测健肠止泻合剂中的特征性指标成分,以应用于相关制剂的质量分析和控制。
主权项:1.一种健肠止泻合剂的检测方法,该健肠止泻合剂由炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅制成,其特征在于,所述检测方法包括对白芍中指标成分芍药苷、陈皮中指标成分橙皮苷和黄连中指标成分盐酸小檗碱的薄层鉴别,以及采用液相色谱法对芍药苷、橙皮苷、盐酸小檗碱的含量测定;其中,对芍药苷、橙皮苷和盐酸小檗碱的鉴别方法,包括以下步骤:S1:取适量健肠止泻合剂,加入甲醇混合提取,过滤得到供试品溶液;S2:分别称取芍药苷对照样品、橙皮苷对照样品、盐酸小檗碱对照样品,加入甲醇制成对照品溶液;S3:选择固定相,将供试品溶液与对照品溶液点样于固定相上并置于展开剂中展开,晾干后观察结果;对芍药苷、橙皮苷和盐酸小檗碱的含量测定,包括以下步骤:(1)称取健肠止泻合剂,加入甲醇稀释,得到供试品溶液;(2)分别称取芍药苷对照样品、橙皮苷对照样品、盐酸小檗碱对照样品,加入含水甲醇溶液配制成对照品溶液;(3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪中,进行测定;(4)采用外标法与相应对照品峰面积进行定量比较分析,以测定供试品溶液中相应成分的含量;当测定成分为芍药苷、橙皮苷时,采用80%的甲醇溶液配制浓度为50~1000μgmL的对照品溶液,通过以下色谱条件进行测定:色谱柱为Cosmosil5C18-AR-II色谱柱,柱温为30℃;进样量为10~20μL;流速为1.0mLmin;检测器为DAD检测器,测定芍药苷的检测波长为230nm,测定橙皮苷的检测波长为283nm;流动相A为乙腈,流动相B为0.1%磷酸,流动相A与流动相B的总体积为100%,进行梯度洗脱;所述梯度洗脱条件为:0~14min时流动相A的体积为14%,14~18min时流动相A的体积为14%~22%,18~28min时流动相A的体积为22%;当测定成分为盐酸小檗碱时,采用50%的甲醇溶液配制浓度为20~500μgmL的对照品溶液,通过以下色谱条件进行测定:色谱柱为Cosmosil5C18-AR-II色谱柱,柱温为30℃;进样量为10~20μL;流速为1.0mLmin;检测器为DAD检测器,检测波长为345nm;流动相为体积比1:1的乙腈-0.05molL磷酸二氢钾混合溶液,进行等度洗脱。
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