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申请/专利权人：吉林浩泰健康产业发展股份有限公司

摘要：本发明属于胆红素提取技术领域，公开了一种牛源胆红素的提取方法。所述牛源胆红素的提取方法，包括以下步骤：步骤（1）：将牛胆用去离子水清洗干净，剪开，将胆汁倒入容器中，用纱布过滤后置于超声清洗器中，超声处理后，得到牛胆汁粗提取液；步骤（2）：将氢氧化钠加入至牛胆汁粗提取液中，调节pH，搅拌，然后加入盐酸调节pH，将处理后的牛胆汁粗提取液与复合吸附树脂进行混合，静态吸附，冲洗，洗脱，旋蒸，得到胆红素粗品；步骤（3）：用二氯甲烷对胆红素粗品进行充分溶解，利用改性超滤膜对其进行减压过滤，旋蒸，浓缩，结晶，得到牛源胆红素。通过该方法可以有效提高牛源胆红素的收率和纯度，其收率可达到0.0351%，纯度在94%以上。

主权项：1.一种牛源胆红素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤（1）：将从屠宰场收集的牛胆用去离子水清洗干净，用不锈钢剪刀将牛胆剪开，将胆汁倒入容器中，用纱布过滤后置于超声清洗器中，超声处理后，得到牛胆汁粗提取液，所述步骤（1）中，纱布的目数为200-400目，超声处理过程中，超声波功率为280-320W，超声波频率为70-80kHz，超声波处理的温度为30-40℃，超声波处理的时间为20-30min；步骤（2）：将氢氧化钠加入至牛胆汁粗提取液中，调节pH，搅拌，然后加入盐酸调节pH，将处理后的牛胆汁粗提取液与复合吸附树脂进行混合，静态吸附，冲洗，洗脱，旋蒸，得到胆红素粗品，所述步骤（2）中，利用氢氧化钠调节pH=11，搅拌时间为15-25min，加入盐酸调节pH=4.8，静态吸附时间为2-3天，用去离子水、甲醇和乙醇分别对复合吸附树脂进行冲洗，复合吸附树脂的制备方法，包括以下步骤：Q1：将杨梅素加入至置于冰水浴中的容器中，再加入氯化亚砜，磁力搅拌后，加热回流，随后，减压蒸馏，得到氯代杨梅素，所述Q1中，杨梅素和氯化亚砜的用量比为（3-5）g：（18-22）mL，加入氯化亚砜后，在容器中装上带有氯化钙干燥管的回流冷凝管，磁力搅拌时间为30-40min，加热回流温度为60-70℃，时间为1-2h；Q2：将氯代杨梅素溶于去离子水中，加入碳酸钾，常温搅拌溶解后，缓慢滴加聚丙烯亚胺三胺树枝状聚合物，加热反应，过滤，滤渣用盐酸溶液进行浸泡，随后用去离子水洗涤至中性，干燥，得到复合吸附树脂，所述Q2中，氯代杨梅素、去离子水、碳酸钾和聚丙烯亚胺三胺树枝状聚合物的用量比为（2-3）g：（6-9）mL：（0.3-0.4）g：（3-4）g，常温搅拌时间为15-20min，加热温度为60-70℃，加热时间为4-6h，盐酸溶液的浓度为0.1molL，浸泡时间为3-5h，干燥温度为70-90℃，干燥时间为8-10h；步骤（3）：用二氯甲烷对胆红素粗品进行充分溶解，利用改性超滤膜对其进行减压过滤，旋蒸，浓缩，结晶，得到牛源胆红素，改性超滤膜的制备方法，包括以下步骤：S1：将多壁碳纳米管浸泡在稀盐酸溶液中，超声处理后，抽滤，洗涤，干燥，得到纯化多壁碳纳米管，将纯化多壁碳纳米管置于硫酸和硝酸的混合溶液中，随后加入碳酸钠，使混合溶液呈中性，浸泡，洗涤，干燥，得到氧化多壁碳纳米管，所述S1中，多壁碳纳米管和稀盐酸溶液的用量比为（8-12）g：1000mL，稀盐酸溶液的浓度为0.5molL，超声处理时间为30-50min，纯化多壁碳纳米管、硫酸和硝酸的用量比为（5-7）g：（100-120）mL：（300-400）mL；S2：将1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺加入至去离子水中，搅拌溶解后加入氧化多壁碳纳米管，超声震荡，然后加入磺胺脒，搅拌溶解，反应，过滤，洗涤，得到复合产物1，所述S2中，1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、去离子水、氧化多壁碳纳米管和磺胺脒的用量比为（10-12）g：（2.5-3）g：500mL：（10-12）g：（20-22.8）g，超声震荡时间为30-40min，反应时间为8-10h；S3：将复合产物1继续加入至溶有1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的去离子水中，超声处理，再加入乙二酸，搅拌溶解后，反应，过滤，洗涤，得到复合产物2，所述S3中，复合产物1、1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、去离子水和乙二酸的用量比为（9-10）g：（10-12）g：（2.5-3）g：500mL：（9-10）mL，超声处理时间为30-40min，反应时间为8-10h；S4：将复合产物2加入至溶有1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的去离子水中，超声处理后，加入磺胺脒，搅拌溶解，反应，过滤，洗涤，得到复合产物3，所述S4中，复合产物2、1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、去离子水和磺胺脒的用量比为（8-10）g：（10-12）g：（2.5-3）g：500mL：（42-43.8）g，超声处理时间为20-30min，反应时间为8-9h；S5：将复合产物3加入至盛有N-甲基吡咯烷酮的容器中，超声处理，随后加入聚偏二氟乙烯和聚乙烯吡咯烷酮至容器中，搅拌得到铸膜液，静置后，利用台式涂布机进行刮膜，成型脱落后，浸泡，干燥，得到改性超滤膜，所述S5中，复合产物3、N-甲基吡咯烷酮、聚偏二氟乙烯和聚乙烯吡咯烷酮的用量比为（0.3-0.6）g：（81.4-81.7）mL：15g：3g，超声处理时间为20-30min，搅拌时间为12-14h，静置时间为10-12h，浸泡时间为10-12h。

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