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申请/专利权人:山东泉港药业有限公司
摘要:本发明公开了重组人白介素‑2‑I的应用,涉及化妆品技术领域。重组人白介素‑2‑I能够显著抑制人黑色素瘤细胞中黑色素的合成,具有美白功效,尤其是在2.5%、5%和10%(vv)浓度的重组人白介素‑2‑I对黑色素合成抑制率显著提高,美白效果明显。重组人白介素‑2‑I未显示体外细胞毒性,是一种安全且有效的美白成分,可以制备成为相应的抑制黑色素合成的美白类产品,广泛应用于化妆品、医美、创伤修复等各个领域。本发明公开的重组人白介素‑2‑I制备、储存、运输便捷,生产成本低,活性保持良好,使用安全,功效优良,适合大规模工业化生产,具有广阔的市场前景。
主权项:1.重组人白介素-2-I的应用,其特征在于:重组人白介素-2-I用于制备美白化妆品;所述重组人白介素-2-I用于抑制黑色素的合成;所述重组人白介素-2-I的制备方法如下,S1种子培养与发酵:取1体积份的重组人白介素-2-I工作种子接种于培养基中,经摇床培养扩增作为4500体积份种子液,接种于发酵罐中培养扩增至5000体积份,得到扩增液;S2收集菌体:使用连续流离心机,离心去除所述扩增液的上清液,收集菌体;S3包涵体的制取与溶解:取所述菌体混悬后用高压均质机破碎,洗涤去除部分菌体碎片与细胞杂质成分,离心获取沉淀物,溶解得到包涵体溶解液;S4粗提:采用层析系统将所述包涵体溶解液洗脱,去除大分子杂蛋白,收集目的蛋白,得到粗提液;S5脱盐复性:采用层析系统处理所述粗提液,收集除盐后蛋白溶液,稀释后加入催化剂氯化铜,氧化复性3小时恢复蛋白高级结构,得到复性液;S6反向高压液相精制:所述复性液通过反相高效液相系统进行纯化,去除杂质,得到高纯度样品液;S7去除流动相、原液过滤除菌:将高效液相收集的所述样品液放入冻干机,利用冷冻干燥的方法去除有机溶剂乙腈;用缓冲液对去除乙腈的白色疏松样品进行溶解,溶解液用滤膜进行除菌过滤后得到重组人白介素-2-I原液;S8半成品配制:将所述重组人白介素-2-I原液与辅料溶液搅拌混匀,经过两级滤器除菌过滤得半成品重组人白介素-2-I;S9成品分装:进行所述半成品重组人白介素-2-I的灌装、半压塞,得到瓶装重组人白介素-2-I;S10冻干:将所述瓶装重组人白介素-2-I冻干、压塞,之后进行轧盖;S11外包装:进行所述瓶装重组人白介素-2-I的灯检、贴签、包装,得到重组人白介素-2-I产品。
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