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申请/专利权人：吉林大学

摘要：本发明公开了一种基于适配体的大肠杆菌O157:H7快速检测方法，属于大肠杆菌O157:H7检测技术领域，包括：步骤一、传感器平衡；步骤二、适配体固定化；步骤三、生物素封闭；步骤四、传感器二次平衡；步骤五、样品检测及结果分析。本发明的检测方法操作简便易学，无需专业人员，可降低人为误差，提高检测结果的准确性和严谨性；检测过程可实时呈现，反应快速，检测时间短；样品无需标记，可做到样品随到随检；可实现高通量检测，检测效率高。

主权项：1.一种基于适配体的大肠杆菌O157:H7快速检测方法，其特征在于，包括：步骤一、传感器平衡，将链霉亲和素传感器末端浸入含0.02％吐温－20的PBS磷酸盐缓冲溶液中平衡30-90秒，所述链霉亲和素传感器为基于生物膜干涉技术的链霉亲和素传感器；步骤二、适配体固定化，将平衡后的链霉亲和素传感器浸入浓度为50-200nM的生物素化的适配体溶液中30-600秒；步骤三、生物素封闭，将固定了适配体的链霉亲和素传感器浸入10μgmL的D-生物素溶液中封闭60-180秒；步骤四、传感器二次平衡，将已封闭的链霉亲和素传感器浸入含0.02％吐温－20的PBS磷酸盐缓冲溶液中平衡30-90秒；步骤五、样品检测及结果分析，将二次平衡后的链霉亲和素传感器浸入样品中进行大肠杆菌O157:H7的检测，实时读取结合信号；对于定性分析，当读取出的结合信号值大于或等于仪器的有效信号值0.0075nm时，即可判定样品中含有大肠杆菌O157:H7；对于定量分析，将结合时间为300秒、600秒、900秒、1200秒时的结合信号y分别代入下述菌浓度和结合信号间的数学公式1、2、3、4：C300＝3.90795×109y^0.14234791；C600＝6.00405×109y^0.15981032；C900＝1.25055×1010y^0.18322843；C1200＝2.52432×1010y^0.20315424；所述C求解所得数值即为样品中大肠杆菌O157:H7的具体浓度，所述C300表示结合时间为300秒时求得的菌浓度，所述C600表示结合时间为600秒时求得的菌浓度，所述C900表示结合时间为900秒时求得的菌浓度，所述C1200表示结合时间为1200秒时求得的菌浓度。

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