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一种利用非天然氨基酸调控目的蛋白释放的方法 

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申请/专利权人:武汉大学

摘要:本发明公开了一种利用非天然氨基酸调控蛋白释放的方法,属于生物技术领域。本发明方法利用非天然氨基酸调控λ噬菌体的生命周期,从而调控蛋白随宿主菌被噬菌体裂解而释放,其包括如下步骤:构建能够表达λ噬菌体Cro蛋白K8TAG突变体、MbPylRS蛋白Y349F突变体、tRNAPyl、被调控的目的蛋白的重组质粒,将其转化到λ噬菌体溶原菌株中,得到的含重组质粒的λ噬菌体溶原菌株扩大培养后转接到含非天然氨基酸s‑6‑烯丙氧基羰基氨基‑2‑氨基己酸的培养基中继续培养,诱导目的蛋白释放。本发明方法适用于大肠杆菌中目的蛋白的调控释放,具有良好的开发和应用前景。

主权项:1.一种利用非天然氨基酸调控蛋白释放的方法,其特征在于:包括如下步骤:1构建能够表达λ噬菌体Cro蛋白K8TAG突变体、MbPylRS蛋白Y349F突变体、tRNAPyl、被调控的目的蛋白的重组质粒;2将步骤1构建的重组质粒转化到λ噬菌体溶原菌株;3步骤2得到的含重组质粒的λ噬菌体溶原菌株扩大培养后转接到含非天然氨基酸s-6-烯丙氧基羰基氨基-2-氨基己酸的培养基中继续培养,诱导目的蛋白释放。

全文数据:

权利要求:

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