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申请/专利权人：宁波鲲鹏生物科技有限公司
摘要：提供了一种双质粒系统，包含用于表达含预定修饰氨基酸的目的蛋白的表达盒的第一质粒和用于表达氨酰基‑tRNA合成酶的表达盒的第二质粒，以及位于第一质粒或第二质粒中的编码人工tRNA的第三表达盒。还提供了含有双质粒系统的宿主细胞或细胞提取液、试剂盒及其用途，以及制备含预定修饰氨基酸的方法。
主权项：1.一种双质粒系统，其特征在于，所述双质粒系统包含：1第一质粒，所述第一质粒包含用于表达目的蛋白的第一表达盒，所述第一表达盒含有编码目的蛋白的第一编码序列，所述第一编码序列中含有用于引入预定的修饰氨基酸的天然密码子，所述天然密码子为UAG琥珀、UAA赭石、或UGA蛋白石；和2第二质粒，所述第二质粒包含用于表达氨酰基-tRNA合成酶的第二表达盒；并且，所述系统还含有用于编码人工tRNA的第三表达盒，其中所述人工tRNA含有对应于所述天然密码子的反密码子，其中所述第三表达盒位于第一质粒和或第二质粒中；并且所述的氨酰基-tRNA合成酶特异性催化所述人工tRNA形成“人工tRNA-Xa”复合物，其中Xa为氨酰基形式的所述预定的修饰氨基酸；其中所述氨酰基-tRNA合成酶为突变型赖氨酰-tRNA合成酶，并且所述突变型赖氨酰-tRNA合成酶对应于野生型赖氨酰-tRNA合成酶发生突变，所述的突变如下：R19H；H29R；R19H和H29R；R19H、I26V和H29R；R19H、H29R、T122S和Y384F；或R19H、H29R、L309A和C348S；并且所述野生型赖氨酰-tRNA合成酶的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 宁波鲲鹏生物科技有限公司 利用双质粒系统在蛋白中引入非天然氨基酸
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