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利用荧光共振能量转移(FRET)进行实时蛋白质印迹测定 

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申请/专利权人:分子装置(奥地利)有限公司

摘要:蛋白质印迹测定包括在含有靶蛋白的膜上执行探测过程,使膜和荧光共振能量转移FRET溶液接触,并且允许探测过程持续探测时间段。探测过程导致供体发色团和受体发色团对靶蛋白进行标记,供体发色团和受体发色团在与靶蛋白连接时是用于FRET的供体受体对。在探测过程中,通过用激发光照射膜以激发供体发色团来测量标记的靶蛋白,其中在每个标记的靶蛋白中,激发的供体发色团通过FRET将能量转移至受体发色团,并且作为响应,标记的靶蛋白发射发射光。然后测量发射光的强度。所测量的光可以是从供体发色团发射的光和或从受体发色团发射的光。

主权项:1.一种用于执行蛋白质印迹测定的方法,所述方法包括:提供支撑在膜上的样品,所述样品包括多种蛋白质,所述多种蛋白质包含多个靶蛋白;通过使所述样品和荧光共振能量转移FRET溶液接触来执行探测过程,并且允许所述探测过程持续探测时间段,其中:所述探测过程产生与第一探针和第二探针结合的多个标记的靶蛋白;所述第一探针均包括供体发色团,所述第二探针均包括受体发色团,并且所述供体发色团和所述受体发色团作为用于FRET的供体受体对是有效的;并且所述荧光共振能量转移FRET溶液中包括所述第一探针或所述第二探针,或同时包括所述第一探针和所述第二探针;以及在执行所述探测过程时,通过以下步骤测量所述标记的靶蛋白:用激发光照射所述膜以激发所述供体发色团,其中在每个标记的靶蛋白中,激发的供体发色团通过FRET将能量转移至所述受体发色团,并且作为响应,所述标记的靶蛋白发射发射光;以及测量所述发射光的强度。

全文数据:

权利要求:

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