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长白山白眉蝮蛇蛇毒的凝胶柱HPLC指纹图谱检测方法 

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申请/专利权人:锦州奥鸿药业有限责任公司

摘要:本发明属于医药技术领域,具体涉及长白山白眉蝮蛇蛇毒的指纹图谱检测方法,所述方法包括如下步骤:1供试品溶液和对照品溶液的制备:分别取长白山白眉蝮蛇蛇毒供试品和长白山白眉蝮蛇蛇毒对照品,用水溶解并稀释,离心,取上清液,过滤;2指纹图谱检测:取步骤1所得滤液注入液相色谱仪,记录色谱图,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算相似度,其中色谱柱用凝胶为填充剂;流动相:50mM磷酸盐+300mMNaClpH7.0,进行等度洗脱。本发明长白山白眉蝮蛇蛇毒指纹图谱的检测方法,具有操作性强、重现性好、专属性高、可作为长白山白眉蝮蛇蛇毒检测鉴别的标准方法。

主权项:1.一种长白山白眉蝮蛇蛇毒的指纹图谱检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:1供试品溶液和对照品溶液的制备:分别取长白山白眉蝮蛇蛇毒供试品和长白山白眉蝮蛇蛇毒对照品,用水溶解并稀释制成每1ml中含1~30mg,在3000~10000rpm,8~16℃的条件下离心15~20min,取上清液,过滤,即得供试品溶液和对照品溶液;2指纹图谱检测:分别取步骤1所得供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算供试品与对照品的色谱图的相似度;所述液相色谱条件包括:色谱柱:所述色谱柱为WatersBioSuite2504umUHRsec或TSKgelSuperSW2000;流动相:50mM磷酸盐+300mMNaClpH6.8~7.2,200mM磷酸盐pH6.8或200mM磷酸盐+0.1%异丙醇pH7.0;柱温为23~27℃;流速为0.33~0.37mlmin;进样体积为5μl,样品盘温度为8-25℃,检测波长为280nm;进行等度洗脱;所述对照品指纹图谱包括8个特征峰,相对保留时间的规定值为:峰1:0.8037、峰2:0.8926、峰4:1.0570、峰5:1.1438、峰6:1.2415、峰7:1.3822、峰8:1.5017,其相对保留时间应在规定值的±5%之内。

全文数据:

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