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申请/专利权人：翌圣生物科技(上海)股份有限公司
摘要：本发明提供一种正向筛选的胞嘧啶甲基化快速检测方法（MAPS），步骤包括：DNA或RNA的5mC在TET酶的氧化作用下转化成5hmC；加入蛋白酶K消解TET酶，磁珠回收核酸；加入过氧钨酸盐，将5hmC氧化为thT，磁珠回收核酸；甲基化检测。本发明方法相比于现有的DNA甲基化检测方法，MAPS具有耗时短、转化率高、准确性高、假阳性低、灵敏度高、操作简单和安全性好等优点，既能够用于qPCR检测，也可以用于高通量测序检测。此外，MAPS不仅能够检测DNA甲基化的位点和水平，还可以对RNA的5mC进行检测。
主权项：1.一种正向筛选的胞嘧啶甲基化快速检测方法，其特征在于其步骤包括：（1）DNA或RNA的5mC在TET酶的氧化作用下转化成5hmC，同时加入还原剂以抑制5hmC进一步氧化成5fC或5caC，反应温度为30-40℃，反应时间为10-60min，TET酶浓度为5-20μM，所述TET酶为mTET2，所述还原剂为氨硼烷锂，氨硼烷锂浓度在10-20mM；（2）加入蛋白酶K消解TET酶，磁珠回收核酸；（3）加入过氧钨酸盐，将5hmC氧化为thT，磁珠回收核酸；（4）甲基化检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 翌圣生物科技(上海)股份有限公司 正向筛选的胞嘧啶甲基化快速检测方法及过氧钨酸盐在将5hmC氧化为thT中的应用
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