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申请/专利权人：天津大学
摘要：本发明公开了一种基于适配体构象变化的NAP2电化学传感检测方法，采用成键刚性较强的鸟嘌呤和胞嘧啶组成适配体的双螺旋茎，适配体对NAP2进行特异性捕获后改变构象，变为发卡结构，使双螺旋茎进行螺旋间堆叠，较强的刚性使其更容易直立，促进电子转移，通过堆叠产生电流，增加检测的灵敏度。将生物变化可视化，首先通过计时电流法将金纳米颗粒电沉积在丝网印刷电极上；然后利用金硫键将适配体捕获链键合在电极表面；并且将互补链与捕获链相结合；接着用巯基己醇对电极进行封闭；最后采用差分脉冲伏安法，实现对NAP2的高灵敏特异性检测。本发明能够精准检测出NAP2的浓度，为肺癌临床诊疗提供实时定量依据。
主权项：1.一种基于适配体构象变化的NAP2电化学传感检测方法，其特征在于，包括：步骤一、基于适配体修饰的电极，对NAP2的特异性捕获，适配体变为发卡结构，使双螺旋茎进行螺旋间堆叠，产生电化学信号；步骤二、通过方波伏安法和差分脉冲伏安扫描法对适配体构象变进行测定；其中，步骤一中适配体修饰的电极其特征包括：通过计时电流法将金离子还原为金纳米颗粒后，修饰在丝网印刷电极上；通过化学吸附，将带有巯基的适配体与金键合，最后用巯基己醇对电极进行封闭；其中，采用差分脉冲伏安法对一系列NAP2标准液进行扫描，包括：采用PBS溶液对NAP2标准品进行稀释，根据浓度梯度所对应的差分脉冲曲线峰值电流与空白对照电流差值与NAP2浓度的对数绘制浓度梯度曲线，并对浓度分别进行拟合，得到线性拟合曲线；所述步骤二中，采用方波伏安法对传感器的捕获性能进行测定，包括：对空白浓度的缓冲液以及加入NAP2溶液分别进行方波伏安法扫描，含有NAP2的扫描曲线峰值电流大于空白缓冲液的电流；所述方波伏安法扫描中的设置为：初始电压为-0.4V，终止电压为0.4V，增量为5mV，振幅为50mV，脉宽为0.05s，周期为0.5s。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 天津大学 一种基于适配体构象变化的NAP2电化学传感检测方法
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