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申请/专利权人：东南大学
摘要：本发明属于核酸检测技术领域，具体涉及一种非诊断目的的肺炎支原体检测方法、系统及应用；所述检测方法包括以下步骤：S1、根据肺炎支原体RNA序列，设计CHA检测探针；S2、制备荧光免疫层析试纸条；S3、将待测样本中裂解的核酸加入到含有CHA检测探针的反应管中，形成混合反应液；S4、将混合反应液滴加至荧光免疫层析试纸条上；然后将荧光免疫层析试纸条插入荧光检测仪，读取检测线和质控线的荧光值。本发明所提供的熵驱动无酶扩增系统联合荧光免疫层析试纸条CHA‑FICA对肺炎支原体的检测方法灵敏度高，且不易被非特异性物质干扰；该方法操作简单，成本低廉，无需聚合酶和PCR仪器，在室温条件下即可进行；有望成为临床肺炎支原体筛查和诊断的标准化工具。
主权项：1.一种CHA检测探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括包括下述步骤：1、获取肺炎支原体的16sRNA测序数据，通过Jalview多序列比对确定Mp16sRNA的保守区域，并将所有保守序列于NCBI进行BLAST；2、构建各个保守序列的二级结构预测模型，排除形成复杂二级结构的区域，最终确定一段30nt–40nt的保守序列作为靶序列T；3、通过热力学计算，比较不同结构的发夹型探针对CHA反应的触发效率，以确定发夹型探针各结构的最适长度；并使用NTPACK软件根据筛选的靶序列T以及CHA探针的设计原则合成对应的CHA检测探针H1和H2；4、将合成的CHA检测探针H1和H2用TNaK溶液稀释至终浓度为10μM，然后进行退火处理使之形成发夹结构，再进行冷藏保存备用。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 东南大学 一种非诊断目的的肺炎支原体检测方法、系统及应用
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