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一种基于斑马鱼肝分区面积比的物质致肝损伤作用的评估方法 

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申请/专利权人:齐鲁工业大学(山东省科学院);山东省科学院生物研究所

摘要:本发明提供了一种基于斑马鱼肝分区面积比的物质致肝损伤作用的评估方法,本发明属于毒理学检测技术领域,本发明将斑马鱼侧体位下的肝脏荧光图中显示的肝脏进行分区,水平线与肝脏相交的最高点记为a点,斑马鱼侧体位黑色素条纹与眼睛交接点记为c点,过c点做水平线,该水平线与肝脏右侧相交点记为b点,将a点和b点直线连接,a、b连线下方记为Ⅰ区,a、b连线上方记为Ⅱ区;本发明采用比较肝分区面积比Ⅱ区面积Ⅰ区面积的变化来快速评价物质对斑马鱼肝脏的影响,克服了使用肝脏总面积作为评价物质对斑马鱼肝损伤作用的指标不够准确的问题,同时也避免了由于斑马鱼个体差异导致肝脏总面积不同而引起的实验误差。

主权项:1.一种基于斑马鱼肝分区面积比的物质致肝损伤作用的评估方法,包括如下步骤:1将受精后72h的发育正常斑马鱼连续给予待测物质孵育,记为待测物质处理组;同时在相同条件下以不含待测物质孵育设置对照,记为对照组;2麻醉步骤1中孵育后的对照组和待测物质处理组的每条斑马鱼,采集每条斑马鱼的肝脏荧光图像,将斑马鱼侧体位下的肝脏荧光图进行分区,水平线与肝脏相交的最高点记为a点,斑马鱼侧体位黑色素条纹与眼睛交接点记为c点,过c点做水平线,该水平线与肝脏右侧相交点记为b点,将a点和b点直线连接,a、b连线下方记为Ⅰ区,a、b连线上方记为Ⅱ区,统计斑马鱼肝脏Ⅰ区面积、肝脏Ⅱ区面积;3计算步骤2得到的每组斑马鱼肝分区面积比,根据如下公式计算:肝分区面积比=肝脏Ⅱ区面积肝脏Ⅰ区面积×100%分析比较对照组与待测物质处理组之间肝分区面积比差异的显著性;当待测物质处理组斑马鱼的肝分区面积比与对照组斑马鱼的肝分区面积比有显著性差异时,则说明该待测物质对肝脏有损伤作用。

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