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一种牦牛卵母细胞中CPEB1蛋白表达定位的检测方法和应用 

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申请/专利权人:中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

摘要:本发明提供了一种牦牛卵母细胞中CPEB1蛋白表达定位的检测方法,提供了牦牛卵母细胞中α‑tubulin蛋白和CPEB1蛋白共染色的具体步骤,及相关抗体和试剂的配置方法。本发明提供了CPEB1蛋白在牦牛卵母细胞减数分裂各时期的表达变化,及α‑tubulin蛋白和CPEB1蛋白在牦牛卵母细胞中的共表达定位情况,所述方法准确可靠。本发明可用于鉴定CPEB1蛋白在牦牛卵母细胞减数分裂不同时期的表达定位,为研究CPEB1蛋白影响牦牛卵母细胞体外成熟提供参考。

主权项:1.一种牦牛卵母细胞中CPEB1蛋白表达定位的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1,获得牦牛卵母细胞,消化处理后进行清洗,再通过透膜液进行处理;步骤2,将封闭后的卵母细胞置于用封闭液稀释的一抗溶液中孵育,再洗涤除去未结合的一抗;所述的一抗采用Anti-CPEB1抗体;步骤3,将卵母细胞置于用封闭液稀释的二抗溶液中孵育,再洗涤除去未结合的二抗,进行封闭处理;所述的二抗采用荧光标记的IgGHL抗体;步骤4,将封闭后的卵母细胞置于用封闭液稀释的Anti-α-tubulin-FITC抗体溶液中孵育,再洗涤除去未结合的抗体;步骤5,进行荧光染色处理,封片后进行观察。

全文数据:

权利要求:

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