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一种基于重组大肠杆菌产生物被膜的方法及其在催化黄酮苷类化合物上的应用 

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申请/专利权人:江苏科技大学

摘要:本发明公开了一种基于重组大肠杆菌高产生物被膜的方法及其在催化黄酮苷类化合物上的应用。以大肠杆菌为原始菌株,分别扩增并构建生物被膜形成关键基因的过表达质粒并转入原始菌株获得过表达菌株,辅以改性聚氨酯纤维作为生物被膜载体,从菌株和载体两个方面加速生物被膜的生长并提高生物被膜的产量,从而改善其催化性能。本发明方法制备的生物被膜的催化效率高催化性能稳定,为其在工业生产领域的应用提供了条件。

主权项:1.一种表达α-L-鼠李糖苷酶RhaB1的生物被膜在黄酮苷类化合物的催化体系中的应用,其特征在于,所述黄酮苷类化合物的浓度为0.001-100gL,催化反应的温度为5-60℃,反应体系的反应pH为2-10,反应时间为0.1-72h,所述黄酮苷类化合物的为芦丁,所述生物被膜的制备方法,包括以下步骤:步骤1,扩增生物被膜形成关键基因,构建含有生物被膜形成关键基因质粒的重组质粒,再将重组质粒转入重组大肠杆菌体内,构建得到生物被膜形成能力强的过表达菌株,其中,所述的生物被膜形成关键基因为群体感应基因、胞外聚合物分泌基因或运动性基因,所述群体感应基因为luxS、lsrB或aphA,所述胞外聚合物分泌基因为rfaP、pgaA、bcsA或wza;所述运动性基因为csgD、fimC或motB;步骤2,对生物被膜载体材料进行改性处理,并将改性后的材料填充于组培瓶中,添加LB培养基,再接入过表达菌株,培养形成生物被膜,其中,所用的改性剂为质量分数0.01-50%的重铬酸钾溶液,改性处理得时间为0.1-48h;步骤3,向形成的生物被膜中添加诱导剂IPTG,调节培养温度,诱导生物被膜表达α-L-鼠李糖苷酶RhaB1。

全文数据:

权利要求:

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