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申请/专利权人：昆明理工大学
摘要：本发明公开了一种Fe,B‑CDs类过氧化物酶检测细菌内毒素的方法，本发明通过微波法合成铁、硼掺杂碳点Fe,B‑CDs纳米酶，Fe,B‑CDs具有类过氧化物酶活性，利用硼与铁元素共掺杂、边缘结构的引入可以通过提高缺陷和丰富的活性位点有效地提高纳米酶的灵敏度，Fe,B‑CDs与细菌内毒素具有好的亲和力，细菌内毒素会抑制Fe,B‑CDs的类过氧化物酶活性，使得Fe,B‑CDs氧化TMB及H2O2体系产生的oxTMB蓝色变浅，且细菌内毒素浓度与oxTMB吸光度降低呈线性关系，由此建立高灵敏、选择性强细菌内毒素检测新方法，将本方法应用于药品及生物制品中细菌内毒素的检测分析，具有灵敏度高、特异性强、操作简单、快速等特点。
主权项：1.一种Fe,B-CDs类过氧化物酶检测细菌内毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：1将2.0-2.5g柠檬酸、0.25-0.50g含硼化合物、0.15-0.20gFeCl3、25-30mg单宁酸及15-20mg多巴胺加入到40-60mL去离子水中，超声处理20-30min后，加入50-100μL乙二胺，将该混合溶液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中，在微波、170-190℃下反应1-2h，反应完成后自然冷却至室温，用0.22μm滤膜除去大颗粒杂质，再经高速离心，上清液真空干燥，制得Fe,B-CDs类过氧化物酶；2分别在不同梯度浓度的细菌内毒素中加入Fe,B-CDs类过氧化物酶溶液，孵育10-15min，加入3,3',5,5'-四甲基联苯胺、H2O2，并加入pH5.5醋酸-醋酸纳缓冲溶液，混匀，静置5-10min，于654nm波长处测定吸光度，建立吸光度与细菌内毒素浓度的定量关系，绘制标准曲线，得到回归方程；3样品中测定，在待测样品液中加入Fe,B-CDs类过氧化物酶溶液，孵育10-15min，加入3,3',5,5'-四甲基联苯胺TMB及H2O2，并加入pH5.5醋酸-醋酸纳缓冲溶液，混匀，静置5-10min，于654nm波长处测定吸光度，吸光度代入步骤2回归方程中，获得样品中细菌内毒素含量。
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权利要求：
百度查询： 昆明理工大学 一种Fe,B-CDs类过氧化物酶检测细菌内毒素的方法
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