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申请/专利权人：安徽德宝生物科技有限公司

摘要：本发明公开了一种工业化一罐式养殖雨生红球藻的方法，包括藻种选育：采用平板法和或稀释培养法培养藻种，将藻种进行扩增培养，选择死亡率低、适合积累虾青素且产量高的藻种；（2）配置培养液：配制营养盐，并使接种后含氮营养盐浓度为0.1‑0.2gL；（3）接种：将步骤（2）的培养液灭菌后输入可控制光源、温度、气量参数的光生物反应器中，然后将步骤（1）得到的经过扩增培养的雨生红球藻藻种接种到所述光生物反应器中；本发明，通过控制培养液中的氮源营养盐和碳源营养盐的含量，有效的使得不同培养阶段过渡期的藻细胞死亡率降低，使得藻细胞的虾青素含量较高，达到4%以上，细胞干重不低于0.65gL，同时培养周期较短。

主权项：1.一种工业化一罐式养殖雨生红球藻的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）藻种选育：采用平板法或稀释培养法培养藻种，选择死亡率低、适合积累虾青素且产量高的藻种，将藻种进行扩增培养；（2）配置培养液：配制营养盐，营养盐按照以下方案分别配置为营养盐母液：硝酸钠100gL，无水磷酸氢二钾75gL，无水磷酸二氢钾75gL，硼酸11.4gL，氯化钠25gL，无水硫酸镁37gL，七水合硫酸亚铁4.98gL，七水合硫酸锌8.82gL，四水合氯化锰1.44gL，二水合钼酸钠1.2gL，五水合硫酸铜1.57gL，六水合硝酸钴0.49gL，乙二胺四乙酸二钠50gL，氢氧化钾31gL，结晶氯化钙25gL；（3）接种：将步骤（2）的培养液分别灭菌后，按照比例加入装有纯水的光生物反应器中，调制成雨生红球藻培养基，然后将步骤（1）得到的经过扩增培养的雨生红球藻藻种接种到所述光生物反应器中；（4）绿色游动细胞阶段培养：所述光生物反应器中设有防水LED灯，按照每1升培养液对应光能强度为1500-2000Lux来设置光照参数，培养温度调整为20-26℃，培养液pH值调整为6.8-7.5，通过通气导管通入无菌空气与二氧化碳的混合气体，通气流量按照每1000升培养液90Lmin设置，空气与二氧化碳混合比值为100:1；培养周期设置为3-5d；（5）红色细胞积累虾青素阶段培养：绿色游动细胞阶段培养完成后，培养液颜色呈墨绿色，进入虾青素的积累阶段，LED灯调整为每1升培养液对应光照强度为4500-5500Lux，培养温度调整为27-30℃，培养液pH调整为值为8-9，只通入无菌空气，通气流量按照每1000升培养液90Lmin设置，并增加碳源营养盐，养殖周期为10-15d；（6）采收：当结束红色细胞积累虾青素阶段培养后，雨生红球藻的培养液深红色时，关闭LED灯，停止通入无菌空气，培养液静置沉降约8h后，使用分离机进行藻液分离，获取其中的雨生红球藻细胞，完成采收作业，上述整个培养周期都在同一个光生物反应器内完成。

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