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申请/专利权人：杭州佰辰医疗器械有限公司
摘要：本发明涉及一种甲状腺球蛋白检测试剂盒及其制备方法与检测方法，试剂盒包括校准品、质控品、内标储备液、蛋白沉淀剂、酶解反应液、蛋白酶解液、内标稀释液、蛋白富集液、淋洗液、蛋白洗脱液和流动相储备液，所述蛋白富集液包括FR14特异性抗体偶联Tosyl磁珠。本发明通过胰蛋白酶酶解Tg蛋白，抗体偶联Tosyl磁珠技术富集和纯化Tg蛋白特征性肽段，从而避免直接检测Tg过程中TgAb带来的干扰，提高Tg检测的准确性；另外，建立较低的定量限，可以满足更高的使用需求。
主权项：1.一种甲状腺球蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括校准品、质控品、内标储备液、蛋白沉淀剂、酶解反应液、蛋白酶解液、内标稀释液、蛋白富集液、淋洗液、蛋白洗脱液和流动相储备液，所述蛋白富集液包括FR14特异性抗体偶联甲苯磺酰基磁珠，所述蛋白富集液通过下述方法制备得到：（1）偶联试剂制备：偶联缓冲液A：0.02～1.2molL硼酸盐缓冲液，pH9.0～9.5；偶联缓冲液B：含2.0～4.0molL硫酸铵的缓冲液A，pH9.0～9.5；偶联封闭或保存液：30～80mmolL三羟甲基氨基甲烷、体积分数0.6～1.5%牛血清清蛋白和体积分数0.05～0.15%吐温-20，pH7.0～7.5；（2）蛋白富集液制备：准备超滤离心管，加水，离心；加偶联缓冲液A置换；取抗体加入准备好的超滤离心管内，离心，再加偶联缓冲液A，离心，重复多次；将离心好的抗体转移到微量离心管中，涡旋，测定抗体浓度；使用涡旋混匀器将甲苯磺酰基磁珠充分混匀悬浮，离心，移除上清液；加的偶联缓冲液A，涡旋分散磁珠后，移除上清；重复一次以上，加入抗体，用偶联缓冲液A补充，涡旋分散磁珠；加入偶联缓冲液B，涡旋混匀；保持磁珠旋转混匀，在30～45℃条件下反应12～20小时后移除上清；加入封闭液，涡旋分散磁珠，保持磁珠旋转混匀，在30～45℃条件下反应6～16h小时，移除上清；加入保存液，涡旋分散磁珠后，移除上清，再重复该步骤一次以上得到磁珠保存液；加入磁珠保存液，涡旋混匀，得到蛋白富集液。
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百度查询： 杭州佰辰医疗器械有限公司 甲状腺球蛋白检测试剂盒及其制备方法与检测方法
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