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摘要:本发明公开了一种质粒载体,所述质粒载体包含双基因敲除载体和多基因敲入模板载体。一种制备多重基因修饰的低免疫原性iPSC细胞株的方法,1B2M和CIITA基因敲除gRNA序列设计;2双基因敲除载体的构建;3基因敲入模板载体的构建;4多基因修饰细胞系的构建:5细胞株的构建:即为多重基因修饰的低免疫原性iPSC细胞株。本发明采用基因编辑技术,通过一个周期的iPSC转导、筛选和单克隆挑取,快速制备多基因修饰的iPSC低免疫细胞株,可规避多轮基因编辑引起的高脱靶率及多轮单克隆细胞扩增引起的iPSC细胞株干性丢失及遗传不稳定性,该细胞株作为通用型iPSC药物开发的母细胞,可广泛应用于不同类型成体细胞药物的开发。
主权项:1.一种质粒载体,其特征在于:所述质粒载体包含双基因敲除载体和多基因敲入模板载体。
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百度查询: 西安九州医学中心有限公司 一种质粒载体和应用该质粒载体制备多重基因修饰的低免疫原性iPSC细胞株的方法
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