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一种AIEFM@PDA为免疫标记物制备的免疫层析试纸条 

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摘要:本发明提供了一种AIEFM@PDA作为免疫标记物制备的免疫层析试纸条,在底板上依次搭接粘贴样本垫、喷涂有UiO‑66@PDA@Ab的玻璃纤维垫、喷涂有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水纸,制成免疫层析试纸条,用于定量检测样本中的待测物浓度,制得的试纸条具有检测灵敏度高的特点。

主权项:1.一种AIEFM@PDA为免疫标记物制备的免疫层析试纸条,其特征在于:包括底板以及在底板上搭接粘贴的滤纸、样本垫、玻璃纤维垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,其中,所述玻璃纤维垫包被有偶联抗体的UiO-66@PDA,该玻璃纤维垫的制备方法包括如下步骤:(1)AIEFM@PDA的制备:在干净小瓶中称取一定质量的PMMA和PMAO,并加入氯仿将其溶解至终浓度分别为20mgmL及60mgmL;随后称取四联苯乙烯四甲酸甲酯溶于上述PMMAPMAO储备液中至终浓度为30mgmL,配置完成后再准确移取480μL于2.4mL浓度为0.25%ww的SDS水溶液中,在冰浴条件下,用超声破碎仪乳化;超声结束后,使用旋转蒸发仪将氯仿除去,剩下的混合物离心,弃上清,清洗两次,用0.01MNaOH将沉淀物浸泡过夜;待最后一次洗涤操作结束后,将沉淀物复溶于1.0mL浓度为0.01M且pH为8.0的BB缓冲液,浓度为20mgmL,4℃避光保存;在10mL的玻璃瓶中加入2mL超纯水和1.5mL的乙醇,加入2mg以上制备的AIEFM并称取1mgDA·HCl加入反应体系中,随后加入2.5mL的浓度为0.01M且pH为8.5的Tris-HCl,避光反应4h后,离心,除去体系中未反应的盐酸多巴胺,4℃避光保存;(2)AIEFM@PDA标记抗体的制备:向制得的AIEFM@PDA中加入待标记抗体,混匀后,孵育1h,之后,加入封闭剂,室温孵育1h,离心取沉淀,得到的沉淀复溶,制成AIEFM@PDA@Ab;(3)喷涂有AIEFM@PDA@Ab的玻璃纤维垫:将制得的AIEFM@PDA@Ab喷涂到玻璃纤维垫上,烘干后即可;所述硝酸纤维素膜上包被有待测物人工偶联抗原或待测物抗体作为检测线,包被有抗鼠抗体或抗兔抗体作为质控线;其中,该硝酸纤维素膜的制备方法,包括如下步骤:(1)使用0.01–0.5MpH6.0–8.0的PBS溶液分别调节包被物待测物人工偶联抗原或待测物抗体、抗鼠源抗体或抗兔源抗体至浓度为0.01–10.0mgmL;其中,待测物抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体、纳米抗体、噬菌体表达抗体;(2)将调整浓度后的待测物人工偶联抗原或待测物抗体喷涂于硝酸纤维素膜上部,作为检测线,将抗鼠抗体或抗兔抗体喷涂于硝酸纤维素膜下部,作为质控线;其中,检测线和质控线之间间隔一定距离,二者的喷量均为0.25~0.74μLcm;(3)将喷涂有检测线和质控线的硝酸纤维素膜于37℃过夜烘干处理后,在室温干燥的环境下保存备用。

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