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摘要:本发明属于生物检测技术领域,具体为一种化学发光免疫检测用免疫磁珠及其制备方法和应用。本发明免疫磁珠为核壳结构,包括磁性内核、环氧壳层、亲水间隔壁、硼酸基偶联层和抗体。本发明首先利用溶剂热法制备磁性内核,利用回流沉淀聚合环氧聚合物壳层,利用含双端巯基的PEG分子和环氧基团进行点击化学反应,修饰亲水PEG长链,最后通过巯基‑双键点击化学反应使硼酸基团固定在微球的表面,制得磁性复合微球;抗体通过结构中的顺二醇基团与微球表面的硼酸基配位键合,偶联于磁珠载体表面,得到化学发光免疫磁珠。该免疫磁珠可应用于肿瘤标志物的检测,具有合成路线简单、易于操作、抗体偶联效率高、检测灵敏性高和特异性强等优点,实现高效的免疫检测。
主权项:1.一种化学发光免疫检测用免疫磁珠,其特征在于,为核壳结构,包括磁性内核、环氧壳层、亲水间隔臂、硼酸基偶联层和抗体;其中:所述磁性内核,为表面修饰有稳定试剂的磁性纳米团簇,所述磁性纳米团簇为γ-Fe2O3、m-γ-Fe2O3、Fe3O4之一种或几种的混合物;所述的稳定剂选自聚谷氨酸、柠檬酸钠、油酸或4-苯乙烯磺酸-共聚-马来酸钠盐;磁性纳米团簇合成的前驱体为氯化铁、氯化铁六水合物、三氯化铁六水合物、硫酸铁水合物或七水硫酸铁;合成所用的成核辅助剂选自乙酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵;所述环氧壳层,为带有大量可反应的环氧官能团的交联功能层;所述亲水间隔臂,为结构中含有双端巯基的单臂或多臂长链PEG分子;所述硼酸基吸附层,为含有大量硼酸配位键的功能层,所述硼酸基团选自含烃基结构的硼酸分子;所述抗体,通过结构中的顺式二醇基团与微球表面的硼酸基配位键合,偶联于所述磁珠载体的表面;所述抗体具体为人的单克隆完全抗体。
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