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申请/专利权人：重庆医科大学
摘要：本发明涉及生物医学技术领域，公开了腺苷转运体ENT1过表达质粒、其构建方法及应用，PCR扩增ENT1基因的上游引物序列和下游引物序列分别见SEQIDNO.2和SEQIDNO.3；PCR扩增mCherry基因的上游引物序列和下游引物序列分别见SEQIDNO.4和SEQIDNO.5；ENT1过表达质粒的序列见SEQIDNO.1。本发明获得的ENT1过表达质粒可表达荧光融合蛋白，可通过观测荧光蛋白的表达间接表征ENT1外源性蛋白的表达；本发明提高了外源蛋白的表达效率，将ENT1蛋白的表达量提高了3倍左右，ENT1蛋白表达可靠，可为后续ENT1上下游的研究提供工具支持。
主权项：1.腺苷转运体ENT1过表达质粒的构建方法，其特征在于，方法如下：1从小鼠N2A细胞系提取总RNA，逆转录后进行PCR扩增，获得ENT1基因；PCR扩增ENT1基因的上游引物序列和下游引物序列分别见SEQIDNO.2和SEQIDNO.3；2对红色荧光mCherry基因进行PCR扩增，获得mCherry基因；PCR扩增mCherry基因的上游引物序列和下游引物序列分别见SEQIDNO.4和SEQIDNO.5；3将腺相关病毒载体用EcoRI和XhoI进行双酶切，然后使用无缝克隆的方式将步骤1中扩增得到的ENT1基因与步骤2中扩增得到的mCherry基因连接至腺相关病毒载体的缺口处，获得新的环状质粒DNA，即ENT1过表达质粒。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 重庆医科大学 腺苷转运体ENT1过表达质粒、构建方法及应用
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