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一种改善CHO细胞生长代谢表达的培养方法 

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申请/专利权人:上海多宁生物科技股份有限公司

摘要:本申请公开了一种改善CHO细胞生长代谢表达的培养方法,涉及细胞培养技术领域,包括:S1:将冻存的CHOK1细胞在高表达培养基里复苏;S2:每2‑3天进行一次传代操作,保持细胞处于早期对数生长期;S3:当细胞密度达到4.5‑6.0×106cellsmL,细胞活率≥95%,间隔2‑3天时,再次传代;S4:按照S2和S3方法传代3次后开始接种,将细胞接种至高表达培养基中进行培养;S5:培养后使用补料培养基进行批次补料;S6:培养14天‑16天收获,检测蛋白浓度;能够利于CHO细胞表达目标蛋白,改善CHO细胞生长、表达。

主权项:1.一种改善CHO细胞生长代谢表达的培养方法,其特征在于,具体包括:S1:将冻存的CHOK1细胞在高表达培养基里复苏,将细胞置于37℃、8%二氧化碳、110-130rpm条件下的摇床中培养;S2:每2-3天进行一次传代操作,保持细胞处于早期对数生长期,细胞接种密度为0.3-1.0-1.0×106cellsmL;S3:当细胞密度达到4.5-6.0×106cellsmL,细胞活率≥95%,间隔2-3天时,再次传代;S4:按照S2和S3方法传代3次后开始接种,将细胞接种至高表达培养基中进行培养;S5:培养后使用补料培养基进行批次补料;每次补料补料培养基的质量占高表达培养基质量的3-8%;至培养结束前1-2天停止补料;S6:培养14天-16天收获,检测蛋白浓度。

全文数据:

权利要求:

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