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申请/专利权人：宁夏大学
摘要：本发明公开了一种动态调控链霉菌次生代谢过程中嗅味物质含量的方法，涉及分子生物学技术领域。本发明公开的动态调控链霉菌次生代谢过程中嗅味物质含量的方法，根据微生物以及目标化合物的种类，根据影响目标化合物合成的第一目标基因，确定第一启动子以及能够靶向第一目标基因的sgRNA序列；采用分子克隆手段，构建得到第一重组质粒；同时确定启动目标化合物合成的第二启动子以及能够编码丧失切割活性的Cas蛋白的基因序列，将两者进行连接，得到调控单元；将第一重组质粒双酶切后的线性化酶切产物与调控单元进行连接，得到时序性动态抑制重组质粒导入链霉菌后，即得到次生代谢过程中嗅味土臭素物质含量降低的链霉菌菌株。
主权项：1.一种动态调控链霉菌次生代谢过程中嗅味物质含量的方法，其特征在于，包括：1根据微生物以及目标化合物的种类，确定影响目标化合物合成的第一目标基因，根据第一目标基因，确定第一启动子以及能够靶向第一目标基因的sgRNA序列；2将靶向第一目标基因的sgRNA序列克隆至出发质粒中，构建得到第一重组质粒；3同时确定启动目标化合物合成的第二启动子以及能够编码丧失切割活性的Cas蛋白的基因序列；4将第二启动子与能够编码丧失切割活性的Cas蛋白的基因序列进行连接，得到调控单元；5将第一重组质粒双酶切后的线性化酶切产物与调控单元进行连接，得到时序性动态抑制重组质粒；6将时序性动态抑制重组质粒导入链霉菌后筛选获得阳性转化子，即得到次生代谢过程中嗅味物质含量降低的链霉菌菌株。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 宁夏大学 一种动态调控链霉菌次生代谢过程中嗅味物质含量的方法
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