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申请/专利权人：东北农业大学;内蒙古草业技术创新中心有限公司

摘要：本发明提供一种鉴定黄芪属和岩黄芪属的方法及其试剂盒与应用，属于生物领域，解决了对黄芪属和岩黄芪属的精准鉴定与区分困难的问题，本发明利用DNA条形码：ITS2、psbA‑trnH、rbcL和matk设计四种引物对如SEQIDNO：1‑8所示，对基因组DNA进行PCR扩增和测序，根据特定位点碱基序列进行物种鉴定与区分，所述的黄芪属为草木樨状黄芪、达乌里黄芪、蒙古黄芪、斜茎黄芪，所述的岩黄芪属为山岩黄芪、华北岩黄芪。本发明实现了对黄芪属和岩黄芪属的精准鉴定与区分，具有鉴定方法简单、快速、效率高、重复性好的优点。

主权项：1.一种鉴定黄芪属和岩黄芪属内不同植物物种的方法，所述的黄芪属为草木樨状黄芪、达乌里黄芪、蒙古黄芪、斜茎黄芪，所述的岩黄芪属为山岩黄芪、华北岩黄芪，其特征在于，步骤如下：S1、从待测样品中提取基因组DNA；S2、以待测样品的基因组DNA为模板，利用DNA条形码引物组：如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示引物进行PCR扩增ITS2序列片段，利用DNA条形码引物组：如SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所示引物进行PCR扩增psbA-trnH序列片段；利用DNA条形码引物组：如SEQIDNO：5和SEQIDNO：6所示引物进行PCR扩增rbcL序列片段；利用DNA条形码引物组：如SEQIDNO：7和SEQIDNO：8所示引物进行PCR扩增matk序列片段；S3、得到扩增产物，经过测序、校对、特征比对，对扩增后的目标DNA条形码序列构建进化树；S4、确定待检测样品的物种：若ITS2基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：9所示，在第27位碱基型为T，则判定该物种为草木樨状黄芪，若ITS2基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：10所示，在第2位碱基型为C和第379位碱基型为A，则判定该物种为达乌里黄芪，若ITS2基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：11所示，在第2位碱基型为C和第379位碱基型为C，则判定该物种为斜茎黄芪，若ITS2基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：12所示，在第81位碱基型为A和第238位碱基型为T，则判定该物种为蒙古黄芪；若psbA-trnH基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：13所示，在第5位碱基型为A，则判定该物种为草木樨状黄芪；若psbA-trnH基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：14所示，在第160位碱基型为C，则判定该物种为山岩黄芪；若psbA-trnH基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：15所示，在第169位碱基型为C，则判定该物种为华北岩黄芪；若psbA-trnH基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：16所示，在第176位碱基型为G，则判定该物种为达乌里黄芪；若psbA-trnH基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：17所示，在第83位碱基型为G，则判定该物种为斜茎黄芪；若rbcL基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：18所示，在第37位碱基型为G，则判定该物种为草木樨状黄芪；若rbcL基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：19所示，在第37位碱基型为A，则判定该物种为蒙古黄芪；若rbcL基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：20所示，在第37位碱基型为C，则判定该物种为斜茎黄芪；若rbcL基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：21所示，在第38位碱基型为G，则判定该物种为达乌里黄芪；若matk基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：22所示，在第16位碱基型为G，则判定该物种为达乌里黄芪；若matk基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：23所示，在第204位碱基型为C，则判定该物种为斜茎黄芪；若matk基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：24所示，在第189位碱基型为A，则判定该物种为草木樨状黄芪；若matk基因片段的DNA条形码，其核苷酸序列为SEQIDNO：25所示，在第94位碱基型为C和第670位碱基型为T，则判定该物种为蒙古黄芪。

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