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申请/专利权人：重庆医科大学
摘要：本发明公开了CtSDR反应系统、基于CRISPR的RNA原位成像方法、研究方法及应用，涉及生物化学技术领域，CtSDR反应系统包括以下原料：Cas12a，crRNA，靶标，ds探针，F‑Q报告探针，RNase抑制剂和NEBuffer。基于CRISPR的RNA原位成像方法，步骤如下：A、将MCF‑7和MCF‑10A细胞在室温下用固定溶液固定；B、固定后，将细胞用含有Triton‑X100的PBS进行透化；然后用PBS洗涤细胞；C、将CtSDR反应系统与细胞进行孵育；D、孵育后使用DAPI对细胞核进行染色，再进行共聚焦成像。通过上述方式，本发明通过利用CRISPR和链置换技术的高效性，实现对胞内RNA的快速检测，极大的缩减现有技术的检测周期，助力临床对致癌性RNA相关疾病的诊断。
主权项：1.一种CtSDR反应系统，其特征在于，CtSDR反应系统包括以下原料：Cas12a，crRNA，靶标，ds探针，F-Q报告探针，RNase抑制剂和NEBuffer；所述crRNA的序列为：UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUCAAGUAGCUUAUCAGAC；所述ds探针由TS和NTS链变性退火形成；所述TS的序列为：AACATCAGTCTGATAAGCTACTTGATAC；所述NTS的序列为：GTATCAAGTAGCTTATCAGACT；靶标采用miRNA-21，序列为：UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA；F-Q报告探针采用FAM-TTATT-BHQ1。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 重庆医科大学 CtSDR反应系统、基于CRISPR的RNA原位成像方法、研究方法及应用
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