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一种用谷氨酸棒状杆菌制备大豆血红蛋白的方法 

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申请/专利权人:安徽医科大学

摘要:本发明公开了一种用谷氨酸棒状杆菌制备大豆血红蛋白的方法,属于生物工程技术领域。本发明提供一组进行密码子优化的大豆血红蛋白表达基因并添加了6xhis组氨酸标签,以及高产豆血红蛋白的谷氨酸棒状杆菌菌株的构建方法,所述方法包括以下步骤:S1、重组质粒的构建;S2、谷氨酸棒状杆菌的转化;S3、谷氨酸棒状杆菌阳性转化子的筛选;S4、蛋白的诱导表达及纯化。相较于目前已知的研究方法,本发明的方法简单,耗时短,产量高,绿色环保;可在食品加工行业进行生产,适于推广应用。

主权项:1.一种制备大豆血红蛋白的谷氨酸棒状杆菌,其特征在于,包括:根据大豆血红蛋白的氨基酸序列合成血红蛋白表达基因并进行密码子优化并添加了6xhis组氨酸标签并设计出PCR引物,扩增出目的蛋白豆血红蛋白的编码基因,并纯化扩增产物;目的蛋白的编码基因与PXMJ19质粒在重组酶中进一步克隆,重组产物至大肠杆菌感受态DH5α,得到LegH重组质粒,将LegH重组质粒导入谷氨酸棒状杆菌感受态细胞中构建而成。

全文数据:

权利要求:

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