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申请/专利权人：中国医科大学附属第一医院
摘要：本发明涉及细胞工程技术领域，具体涉及一种胃癌腹水类器官与腹腔间皮细胞层共培养模型的构建方法。本发明采用24孔板板底铺入稀释后基质胶，然后用单层间皮细胞覆盖，改变传统基质胶滴类器官培养方法，用悬浮培养方法替代传统基质胶滴培养类器官，使悬液中的类器官与培养基充分且均一的接触，有助于类器官摄取养分。本发明公开的构建方法，模拟胃癌腹膜转移过程中，腹水中悬浮肿瘤细胞与腹膜间皮层接触的病理生理状态，用于说明胃癌腹膜转移时肿瘤细胞与间皮细胞相互作用及相关机制。本发明的技术方案不仅更为真实的复现了胃癌腹膜转移的情景，且在节省了实验成本的同时极大提升了类器官的培养体量。
主权项：1.一种胃癌腹水类器官与腹腔间皮细胞层共培养方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤1.单层间皮细胞培养：（1）由人网膜组织原代培养得到的间皮细胞，分选得到高纯度间皮细胞，用间皮细胞培养基培养传代；（2）细胞培养皿底部覆盖间皮细胞培养基与基质胶混合后的悬液；（4）将（1）所得间皮细胞铺入（2）中的细胞培养皿，加入间皮细胞培养基，培养至细胞融合度约80%，得到单层间皮细胞；步骤2.类器官悬浮共培养：（1）采用胃癌腹水类器官培养基，培养原代人胃癌腹水肿瘤类器官，传代；（2）将胃癌腹水肿瘤类器官培养基与间皮细胞培养基混合后加入基质胶混合均匀置于冰上，形成悬浮培养混合培养基；（3）用TryplE消化（1）为单细胞后，向其中加入（2）所制得悬浮培养混合培养基；（4）将（3）所得类器官混悬液加入到步骤1所得单层间皮细胞中，在37℃恒温震荡，显微镜下观察细胞均匀分布后，将共培养体系置于孵箱中进行培养；（5）每3天更换悬浮培养混合培养基，重复步骤（4）。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国医科大学附属第一医院 一种胃癌腹水类器官与腹腔间皮细胞层共培养模型的构建方法
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