买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：中国科学技术大学

摘要：本发明涉及生物传感器领域，特别涉及基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法。本发明提供的检测方法及其外加磁场的微悬臂阵列梁传感平台，可以克服传统检测上的一些限制，外加磁场后由于每个外泌体上结合的磁纳米颗粒在磁场中受到的较大的磁场作用力，可以将种微小的分子间作用力等效转换为磁场力。这种方案操作简便，可大大降低样本消耗量，检测灵敏度为小于10个外泌体mL，使检测时间缩短为10～30min，在基于免疫测定的现场及时诊断工具的开发中显示巨大潜力。

主权项：1.生物传感组合物，其特征在于，包括磁颗粒、外泌体和阵列梁；所述磁颗粒与所述外泌体结合；还包括探针；所述探针修饰到所述阵列梁上，且所述外泌体的表面蛋白与所述探针结合；所述阵列梁的处理方法为：（1）阵列梁放置于酶孔板中，加入VH2SO4:VH2O2=3:1的食人鱼溶液清洗悬臂梁表面10min，去离子水清洗三次，氮气吹干；四根毛细管分别插入1,3,5,7号梁表面修饰上探针分子EGFR2h，所述探针分子EGFR为N-SH-C6-GCCTTAGUAACGTGCTTTGATGTCGATTCGACAGGAGGC-C，取出放入酶孔板，PBST溶液清洗3次，氮气吹干；由于探针分子一端已经修饰了巯基，与梁的金表面发生反应化学反应形成Au-S键结合到梁表面；（2）加入封闭试剂6-巯基-1-己醇室温放置30min，PBST清洗3次，氮气吹干；目的是将金表面未结合探针分子的空白位点占据，防止非特异性吸附对偏转检测结果带来影响；（3）磁颗粒浓缩富集后的外泌体溶液加入到上一步修饰好的阵列梁中，让外泌体表面蛋白EGRG与修饰到梁上的探针分子结合90min，PBS清洗一次；所述磁颗粒浓缩富集后的外泌体溶液的制备方法包括：步骤1、适配体CD63偶联磁颗粒：1）取5mL浓度为1mgmL、粒径为10nm的Fe3O4溶液至100KD超滤管，4000g离心，弃下清，加入15mMMES洗涤两次，并用MES重悬定容至4.7mL；2）分别涡旋加入5OD适配体、2mgEDC，迅速颠倒混匀后于37℃震荡反应过夜，转速150rpmmin，反应时间20h；3）反应结束后，将反应液取出，采用100KD超滤，收集下清，用于检测偶联率；4）使用纯化水超滤洗涤样品3次，并定容至5mL，即为偶联适配体的10nmFe3O4；步骤2、将偶联适配体的磁颗粒稀释到12.5μgml与外泌体混合，室温放置2h，让偶联适配体的磁颗粒充分结合外泌体。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学技术大学 基于磁增强检测外泌体的微悬臂梁传感器及方法