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申请/专利权人：中国农业大学三亚研究院
摘要：本发明公开了shRNA表达系统及其在草地贪夜蛾基因干扰的应用。本发明包括含有特定颈环结构序列的shRNA合成骨架，以及一种shRNA表达载体pET‑28a‑MCS1‑linker。用所述shRNA合成骨架与预测的目标siRNA连接形成shRNA，将目标shRNA连接到表达载体pET‑28a‑MCS1‑linker，在大肠杆菌细胞中实现目标shRNA的大量表达。本发明提供了利用上述表达系统合成shRNA实现草地贪夜蛾基因干扰的应用方法，将shRNA导入草地贪夜蛾幼虫体内，可有效实现草地贪夜蛾靶标基因的干扰。
主权项：1.一种鳞翅目昆虫shRNA，其特征在于，所述shRNA为：根据合成骨架设计能够相互退火形成双链的顶部链寡核苷酸和底部链寡核苷酸，通过退火处理获得所述shRNA；所述合成骨架的结构为：中间含有颈环结构，颈环结构的两端连接可变序列；在shRNA中所述可变序列替换为siRNA正义链和反义链；所述顶部链寡核苷酸的序列依序为：5’-酶切位点、siRNA反义链、颈环结构序列、siRNA正义链和碱基g；所述底部链寡核苷酸的序列依序为：5’-酶切位点、siRNA反义链、顶部链寡核苷酸的颈环结构序列的反补序列、siRNA正义链和碱基a；所述颈环结构的序列为：tggttcattcgcac、cgtttgcatccct和attcttccagagtc中的一种时，所述siRNA反义链的序列为chy516：5’-AGAATCAGGTCTGGTGGTTCC-3’；或所述颈环结构序列为attcttccagagtc时，所述siRNA反义链的序列为chy816：5’-CAGAACTGGCTGAGGGCTGTC-3’；所述siRNA正义链的序列为与其siRNA反义链反补的序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国农业大学三亚研究院 shRNA表达系统及其在草地贪夜蛾基因干扰的应用
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