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申请/专利权人：阿尔德弗龙有限责任公司
摘要：本文提供了产生治疗性环状DNA载体的改进方法，通过此类方法产生的药物组合物，以及使用药物组合物的方法。本发明至少部分基于涉及限制性消化和连接方案的无细胞制造方法，诸如涉及IIs型限制性酶的限制性消化方法。本文提供的方法适合于治疗性环状DNA载体的高纯度组合物的大规模产生。
主权项：1.一种产生治疗性环状DNA载体的方法，所述方法包括：a提供包含模板DNA载体的样品，所述模板DNA载体包含治疗性序列和骨架序列；b使用聚合酶介导的滚环扩增来扩增所述模板DNA载体以产生线性多联体；c用IIs型限制性酶来消化所述线性多联体，所述IIs型限制性酶切割所述线性多联体的每个单位的第一位点和第二位点，其中所述第一位点和第二位点侧接所述治疗性序列并形成自互补的突出端，从而产生线性治疗性片段和线性骨架片段，其中所述线性治疗性片段包含所述治疗性序列，并且所述线性骨架片段包含所述骨架序列或其一部分；和d使所述线性骨架片段和所述线性治疗性片段与连接酶接触，以产生环状骨架和缺少IIs型限制性位点的治疗性环状DNA载体。
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权利要求：
百度查询： 阿尔德弗龙有限责任公司 环状DNA载体的合成产生
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