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申请/专利权人：北京化工大学
摘要：本发明属于核酸编辑领域，提供一种融合蛋白，包括Cas9蛋白、Brex27蛋白和FadR蛋白，包括该融合蛋白的CRISPR‑Cas9基因编辑系统，以及使用该融合蛋白在真核表达系统中进行大片段DNA定点整合的方法。本发明在酿酒酵母中实现了10kbDNA片段的整合，效率为93％，而40kbDNA片段包括16个基因表达盒的整合效率约为80％。本发明在整合大片段DNA方面表现出极高的效率，操作灵活简便，并能在目标位点实现精确无痕整合。不仅加快了细胞工厂的构建，还丰富了酿酒酵母的合成生物学工具箱。
主权项：1.融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白包括Cas9蛋白、Brex27蛋白和FadR蛋白，融合顺序为：Cas9-Brex27-FadR；作为优选，所述Cas9蛋白包含与SEQIDNO.9中的至少95％同一的序列；作为进一步优选，所述Cas9蛋白为SEQIDNO.9的序列；和或所述Brex27蛋白包含与SEQIDNO.10中的至少95％同一的序列；作为进一步优选，所述Brex27蛋白为SEQIDNO.10的序列；和或所述FadR蛋白包含与SEQIDNO.11中的至少95％同一的序列；作为进一步优选，所述FadR蛋白为SEQIDNO.11的序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京化工大学 一种融合蛋白及使用其进行大片段DNA定点整合的方法
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