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申请/专利权人：苏州方昆医药科技有限公司
摘要：本发明公开了一种HPLC‑MSMS法检测血浆中米洛巴林的方法。所述方法采用蛋白沉淀法进行预处理；色谱条件采用AgelaVenusilMPC182色谱柱，以5mM醋酸铵的水溶液和乙腈为流动相，进行梯度洗脱；质谱条件采用电喷雾电离源ESI串联质谱，并以对乙酰氨基酚为内标进行定量检测。本发明方法操作简便、分析速度快、灵敏度高、线性范围合适，满足临床研究大批量样品分析需求。
主权项：1.一种HPLC-MSMS法检测血浆中米洛巴林的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）预处理：向血浆样品中加入内标溶液，在血浆样品中加入乙腈沉淀蛋白，离心后取上清液，加水稀释后，得供试品，其中所述内标溶液为对乙酰氨基酚经甲醇溶解后，以乙腈-水，50:50，vv，稀释得到，内标溶液的加入量为血浆样品的0.5-2倍，所述血浆样品的体积为30-100µL；血浆样品中米洛巴林的含量为1.00-500ngmL，供试品中内标物质的含量为10-40ngmL；（2）采用HPLC-MSMS检测经过预处理的血浆样品，经内标定量法测定其中米洛巴林的含量，其中：色谱条件：色谱柱：AgelaVenusilMPC182色谱柱；流动相A：5mM醋酸铵的水溶液，流动相B：乙腈；梯度洗脱程序：0-1.4min：流动相B为40%；1.4-1.5min：流动相B为40%→90%；1.5-2.5min：流动相B为90%；2.5-2.6min：流动相B为90%→40%；2.6-3.0min：流动相B为40%；流动相流速为0.7mLmin；进样量为10.0µL；柱温：40℃；质谱条件：离子源：电喷雾离子源；正离子扫描；多反应监测；喷射电压为5500V；离子源温度为550℃；气体1：55psi，气体2：55psi，气帘气体：35psi，碰撞诱导解离：6psi，驻留时间：300ms；米洛巴林定量分析离子对：mz210.2®133.0，碰撞能量：20eV，去簇电压：100V；对乙酰氨基酚定量分析离子对：152.1®110.0，碰撞能量：21eV，去簇电压：100V。
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