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一种促进酿酒酵母合成7-脱氢胆固醇的方法 

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申请/专利权人:江南大学

摘要:本发明公开了一种促进酿酒酵母合成7‑脱氢胆固醇的方法。本发明通过对磷酸甲戊酸激酶ERG8和鲨烯合酶ERG9进行突变,并分别或同时整合进酿酒酵母基因组中,得到了几株7‑脱氢胆固醇产量明显提升的突变菌株,其中,磷酸甲戊酸激酶ERG8涉及75、187、192、205、206、314、322、349等一个或多个位点的突变,鲨烯合酶ERG9涉及96、108、146、208、209、251、252、258、286、345、355、388、389、404、426、434等一个或多个位点的突变。本发明提供的酿酒酵母突变体可实现7‑DHC的生产,为代谢工程改造酿酒酵母促进7‑DHC合成奠定了基础。本发明提供的酿酒酵母突变体构建方法简单,便于使用,具有很好的应用前景。

主权项:1.一种重组酿酒酵母,其特征在于,所述重组酿酒酵母包括以下改造:异源表达24-脱氢胆固醇还原酶;过表达磷酸甲戊酸激酶突变体和或鲨烯合酶突变体;所述磷酸甲戊酸激酶突变体相比SEQIDNO.2所示的氨基酸序列至少具有以下突变之一:将第75位丝氨酸突变为苏氨酸,将第187位缬氨酸突变为天冬氨酸,将第192位丙氨酸突变为丝氨酸,将第205位丝氨酸突变为苏氨酸,将第206位甘氨酸突变为精氨酸,将第314位丝氨酸突变为苏氨酸,将第322位苏氨酸突变为组氨酸,将第349位谷氨酸突变为丙氨酸;所述鲨烯合酶突变体相比SEQIDNO.8所示的氨基酸序列至少具有以下突变之一:将第96位亮氨酸突变为赖氨酸,将第108位色氨酸突变为丝氨酸,将第146位谷氨酸突变为丙氨酸,将第208位谷氨酸突变为天冬氨酸,将第209位谷氨酰胺突变为谷氨酸,将第251位赖氨酸突变为天冬酰胺,将第252位天冬氨酸突变为组氨酸,将第258位天冬酰胺突变为苯丙氨酸,将第286位甘氨酸突变为丝氨酸,将第345位苯丙氨酸突变为天冬酰胺,将第355位赖氨酸进行缺失突变,将第388位天冬酰胺突变为异亮氨酸,将第389位缬氨酸突变为谷氨酸,将第404位丝氨酸突变为色氨酸,将第426位丝氨酸进行缺失突变,将第434位甘氨酸突变为脯氨酸。

全文数据:

权利要求:

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