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一种动态观察iPSC-CM结构以确定其最佳状态的方法 

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申请/专利权人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院

摘要:本发明涉及生物实验技术领域,具体涉及了细胞类型和分化的鉴定,本发明提出一种动态观察iPSC‑CM结构以确定其最佳生存状态的方法,将激光扫描共聚焦显微镜和透射电子显微镜联合应用,通过该方法不仅可观察iPSC‑CM状态以确定最佳给予处理因素的时间,还可明确不同成熟度iPSC‑CM的超微结构特点,为心肌细胞质量检测和建立疾病模型及相关机制研究实验的重复性和可靠性奠定基础。

主权项:1.一种确定用于建立心脏疾病模型的最适心肌细胞的方法,其特征在于,包括:1获取iPSC-CM复苏后经过不同培养时间的细胞;2针对1中培养后的细胞,利用免疫荧光染色方法,对持续表达的心肌特异标记物和或与心脏发育成熟相关的标志物进行染色,并对细胞核进行染色,获得染色后的细胞;3针对1中培养后的细胞,进行电镜制片,获得细胞电镜样本;4分别对2和3获得的细胞样本进行激光扫描共聚焦显微镜和透射电镜观察,根据细胞的形态特征,获取步骤1中复苏后合适的培养时间,其中,所述合适的培养时间为适于作为建立心脏疾病模型的心肌细胞的培养时间。

全文数据:

权利要求:

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