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申请/专利权人：南京合谷生命生物科技有限公司
摘要：本申请涉及生物催化与生物合成技术领域，具体公开了一种以谷氨酸为底物生物合成N‑乙酰观蓝代谢工程菌的构建方法与应用，本申请的代谢工程菌可先利用谷氨酰胺合成酶和N‑乙酰谷氨酸合成酶直接将廉价的谷氨酸分别合成谷氨酰胺、N‑乙酰谷氨酰胺，然后再利用观蓝合成酶和4’‑磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶进一步将谷氨酰胺、N‑乙酰谷氨酰胺合成N‑乙酰观蓝。本申请在大肠杆菌、谷氨酸棒状杆菌、酿酒酵母、变铅青链霉菌中均通过引入观蓝合成酶编码基因、4’‑磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶编码基因、谷氨酰胺合成酶编码基因和N‑乙酰谷氨酸合成酶编码基因实现催化谷氨酸为底物生物合成N‑乙酰观蓝，极大降低N‑乙酰观蓝生产成本，提高生产效率。
主权项：1.一种以谷氨酸为底物生物合成N-乙酰观蓝代谢工程菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：向宿主菌导入观蓝合成酶编码基因bpsA、4’-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶编码基因EntD、谷氨酰胺合成酶编码基因glnA和N-乙酰谷氨酸合成酶编码基因argA构建得到代谢工程菌；利用所述代谢工程菌催化谷氨酸生物合成N-乙酰观蓝；所述宿主菌包括大肠杆菌（E.coli）、谷氨酸棒状杆菌（C.glutamicum）、酿酒酵母（S.cerevisiae）和变铅青链霉菌（S.lividans）中的至少一种；所述观蓝合成酶编码基因的核苷酸序列包括SEQIDNO：1所示的核苷酸序列；所述4’-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶编码基因的核苷酸序列包括SEQIDNO：2所示的核苷酸序列；所述谷氨酰胺合成酶编码基因的核苷酸序列包括SEQIDNO：3~6任一项所示的核苷酸序列；所述N-乙酰谷氨酸合成酶编码基因的核苷酸序列包括SEQIDNO：7~10任一项所示的核苷酸序列。
全文数据：
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百度查询： 南京合谷生命生物科技有限公司 一种以谷氨酸为底物生物合成N-乙酰观蓝代谢工程菌的构建方法与应用
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