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申请/专利权人：华南农业大学
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种具有补肾壮阳功效的九香虫多肽及其制备方法和应用。本发明经过九香虫水提液制备、九香虫粗肽制备、离子交换树脂层析、凝胶柱层析、高效液相色谱纯化等过程制备得到具有补肾壮阳功效的九香虫多肽。本发明提供的九香虫多肽能够显著促进TM3细胞的睾酮分泌，从而达到补肾壮阳的功效，拓展了九香虫的应用范围。
主权项：1.一种九香虫多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：步骤1：将九香虫脱脂干燥打粉后进行水提，得到九香虫水提液；步骤2：对所述九香虫水提液进行复合酶解，酶解结束后灭酶、固液分离，收集酶解液，干燥，得到九香虫粗肽；所述复合酶解采用中性蛋白酶和碱性蛋白酶；步骤3：将所述九香虫粗肽溶于水中，配制成九香虫粗肽溶液，过滤，将所得滤液进行离子交换树脂层析，以氯化钠溶液作为洗脱液，根据220nm下吸光度曲线收集能显著提高TM3细胞活力的洗脱成分，随后经干燥处理得到离子交换层析酶解物；所述离子交换树脂层析采用纤维素阴离子交换层析柱；步骤4：将所述离子交换层析酶解物溶于水中，配制成离子交换层析酶解物溶液，进行凝胶柱层析，以去离子水作为洗脱液，根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分；随后经干燥处理得到凝胶层析酶解物；所述凝胶柱层析采用葡聚糖凝胶层析柱；步骤5：将所述凝胶层析酶解物溶于水中，利用反相高效液相色谱分离纯化，收集能显著提高TM3细胞活力的蛋白多肽，得九香虫多肽；所述反相高效液相色谱中色谱柱为C18色谱柱，流动相A为0.1％-0.4％三氟乙酸-水溶液，流动相B为0.1％-0.4％三氟乙酸-乙腈溶液，线性梯度洗脱；所述线性梯度洗脱的程序为：0-5min，流动相为95％流动相A+5％流动相B；5-15min，流动相B的比例由5％线性增加至30％；15-30min，流动相B的比例由30％线性增加至90％；30-32min，流动相为10％流动相A+90％流动相B。
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百度查询： 华南农业大学 一种具有补肾壮阳功效的九香虫多肽及其制备方法和应用
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