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申请/专利权人:云南大学
摘要:本发明公开了高杀线虫活性紫色紫孢菌工程菌ΔPlGyp1及其构建方法和应用,属于生物农药技术领域。本发明工程菌ΔPlGyp1为敲除紫色紫孢菌的PlGyp1基因后获得;工程菌的保藏编号为CGMCCNo.41039,PlGyp1基因的序列如SEQIDNO.1所示,PlGyp1氨基酸的序列如SEQIDNO.2所示。本发明利用同源重组方法构建PlGyp1基因敲除载体;将供体质粒pPK2‑sur氯密磺隆抗性基因‑GFP、限制性内切酶XbaⅠ和BglⅡ和PlGyp1基因5’端同源重组片段及限制性内切酶BssHⅡ和3’端同源重组片段进行Infusion克隆反应得到PlGyp1基因敲除载体;将PlGyp1基因敲除载体转入农杆菌中得到含PlGyp1基因敲除载体的农杆菌;将含PlGyp1基因敲除载体的农杆菌转化紫色紫孢菌;筛选Gyp1转化子,并依次采用验证引物对Y5’FY5’R、Y3’FY3’R、Gyp1‑FGyp1‑R和sur‑Fsur‑R进行验证,即得高产孢量紫色紫孢菌的工程菌ΔPlGyp1。
主权项:1.高杀线虫活性紫色紫孢菌工程菌ΔPlGyp1,其特征在于:所述工程菌ΔPlGyp1是敲除紫色紫孢菌的PlGyp1基因获得,工程菌ΔPlGyp1的保藏编号为CGMCCNo.41039。
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权利要求:
百度查询: 云南大学 高杀线虫活性紫色紫孢菌工程菌ΔPlGyp1及其构建方法和应用
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