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微生物基因改造靶点的鉴定方法及其应用 

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申请/专利权人:南京师范大学

摘要:本发明涉及微生物基因改造技术,公开了一种微生物基因改造靶点的鉴定方法及其应用。该鉴定方法包括以下步骤:将外源Cas效应蛋白表达框整合到原始菌株中得到改造工程菌,合成靶向原始菌株的基因组编码区的sgRNA文库;将所述sgRNA文库导入所述改造工程菌中获得多个突变菌株;将多个所述突变菌株进行发酵筛选得到目标产物产量高于原始菌株的突变菌株作为目标菌株;对目标菌株进行基因测序,鉴定提高原始菌株合成目标产物能力的基因组靶点。该靶点鉴定方法能够方便、快捷地鉴定出微生物的新靶点,获得高产目标产物的突变菌株,为微生物菌株的代谢工程改造提供了新的平台。

主权项:1.一种微生物基因改造靶点的鉴定方法,其特征在于,该鉴定方法包括以下步骤:(1)将外源Cas效应蛋白表达框整合到原始菌株中得到改造工程菌,合成靶向原始菌株的基因组编码区的sgRNA文库;(2)将所述sgRNA文库导入所述改造工程菌中获得多个突变菌株;(3)将多个所述突变菌株进行发酵筛选得到目标产物产量高于原始菌株的突变菌株作为目标菌株;(4)对目标菌株进行基因测序,鉴定提高原始菌株合成目标产物能力的基因组靶点。

全文数据:

权利要求:

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