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一种人脐带血来源的外泌体及其制备方法和用途 

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申请/专利权人:广州医科大学附属第二医院

摘要:本发明公开了一种人脐带血来源的外泌体及其制备方法和用途,通过将差速离心、蔗糖密度梯度和超滤法等方法结合对人脐带血外泌体进行分离纯化;本发明人脐带血来源的外泌体的制备方法以天然存在的人脐带血为原料,无需经过人工的修饰和改造,减少质量及安全性风险,对外泌体的获取更便捷,成本亦更低,易推广,对于进一步充分利用了脐带血资源有重要的意义;另外,相对于通过培养的细胞中获取的外泌体,外泌体中的调控因子成分更丰富,经实验证明,本发明方法提取的外泌体能够有效抵抗内皮细胞和机体衰老,具有巨大的临床和经济价值。

主权项:1.外泌体在制备抗衰老产品中的用途,其特征在于,所述衰老为过氧化氢诱导的细胞衰老、阿霉素诱导的细胞衰老、内皮细胞自然衰老或机体衰老;所述外泌体是指脐带血中大小为30-200nm细胞外小囊泡,提取方法包括以下步骤:1将脐带血和预冷的PBS按体积比为1:0.5~3混合,2通过差速离心分离得到初步的外泌体混合物1;3将所述外泌体混合物1加入蔗糖垫溶液,通过密度梯度离心分离得到含有外泌体的蔗糖溶液;4收集所述含有外泌体的蔗糖溶液,转移至截留值至少为100kD超滤管中进行超滤,并通过PBS洗涤截留组分;5收集滤网中的截留组分即为所述人脐带血来源外泌体;所述步骤3中的蔗糖垫溶液为包括由下至上如下浓度梯度的蔗糖溶液:2M,1.3M,1.16M,0.8M,0.5M,0.25M;所述步骤2中的差速离心包括如下步骤:250~350g离心10~20分钟;取上清,1800~3000g离心15~25分钟,重复该步骤两次;取上清,9000~15000g离心30~120分钟;取上清,90000~140000g离心30~180分钟;所述步骤3的密度梯度离心包括如下步骤:90000~140000g离心2~18小时。

全文数据:

权利要求:

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