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申请/专利权人：临沂大学;临沂金锣文瑞食品有限公司

摘要：本发明公开了一种基于GC‑MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法，属于内源性物质检测技术领域，包括以下步骤：食糜或粪便样品前处理：将事先采好的结肠、盲肠食糜或粪便样品解冻，搅拌混匀，均匀称取适量样品于离心管，加入适量超纯水，涡旋混匀并静置一定时间，静置后离心一定时间，再加入检测溶液，混匀后孵育一定时间再进行离心，离心加入一定量的色谱甲醇，涡旋混匀在离心一定时间，过滤一定的溶液至EP管中；气相色谱测定；结果与分析。该基于GC‑MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法，可以整体诊断体内厌氧菌的变化，对营养、微生物和环境的研究有重要意义。

主权项：1.一种基于GC-MS检测动物肠道食糜或粪便中戊酸的方法，包括，其特征在于：包括以下步骤：步骤1、食糜或粪便样品前处理：将事先采好的结肠、盲肠食糜或粪便样品解冻，搅拌混匀，均匀称取适量样品于离心管，加入1.5mlV0超纯水，涡旋混匀并静置30分钟，静置后10000xg离心15分钟，取1mlV1上清加入0.2mlV225％WV偏磷酸溶液、23.3ulV3210mmolL巴豆酸溶液，混匀后4℃放置孵育30分钟，之后8000xg高心分钟，离心后取0.3mlV4上清加入0.9mlV5色谱甲醇，涡旋混匀，8000xg离心5分钟，取上清用0.22μm针式过滤器过滤至1.5mlEP管中，上机检测。步骤2、气相色谱测定：取步骤1所得样本进行GC-MS检测：色谱条件：进样口温度220℃，进样量1μL，分流比50：1；载气为高纯N2，柱流量1mlmin；FID检测器温度250℃，燃气高纯H2流量40mlmin，助燃气零级空气流量400mlmin，尾吹气高纯N2流量35mlmin，色谱柱HP-FFAP，柱温箱程序升温：起始温度100℃，以20℃min的速度升温至190℃，保持0.5分钟，运行时间5分钟。步骤3、结果与分析：对步骤2所得的数据进行方法学验证，进行线性、检测限、重现性和加标回收率测定，并对结果进行分析。

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